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超級(jí)馬力新蟲(chóng) (小有名氣)
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最近做原核表達(dá)，蛋白全在在包涵體中，優(yōu)化了條件也不行，怎么辦？ 已有1人參與
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最近用Rosetta菌株表達(dá)一個(gè)植物蛋白，使用的是pET28a載體，18度誘導(dǎo)過(guò)夜全在包涵體中，通過(guò)純化上清，只能拿到很少的蛋白。后來(lái)在16度條件下優(yōu)化條件，包括誘導(dǎo)劑的量，誘導(dǎo)時(shí)間，加葡萄糖或乙醇。但是沒(méi)有效果。請(qǐng)問(wèn)有經(jīng)驗(yàn)的高手有什么好的建議嗎？ PS：圖片中是16度優(yōu)化條件的結(jié)果。蛋白大小大概是50kDa。 Administrator 2016-04-22 01hr 25min.jpg Administrator 2016-04-22 01hr 27min.jpg |
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空空如也的左
新蟲(chóng) (初入文壇)
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5樓2018-06-15 15:56:50
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加個(gè)gst標(biāo)簽之類的蛋白幫助一下，但是先打個(gè)預(yù)防針，不是所有蛋白都能可容表達(dá)，如果可行可以考慮復(fù)性 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
2樓2016-04-23 16:21:39
原海亮
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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超級(jí)馬力: 金幣+5, ★★★很有幫助 2016-04-25 10:12:45
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加標(biāo)簽是可以，但是我們通常可以嘗試下其他表達(dá)載體，比如換一些啟動(dòng)子較弱的載體 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2016-04-23 21:23:28
star013 
新蟲(chóng) (知名作家)
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4樓2016-04-24 10:31:47
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