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求助:純化蛋白，蛋白出現(xiàn)不掛柱現(xiàn)象? 已有1人參與
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第一:proteinG的柱子，用過四五次，沒有出現(xiàn)過這種情況。 第二:上樣的過程中，中間出現(xiàn)雜蛋白吸收峰升高，以往也木有出現(xiàn)，當(dāng)時(shí)還以為是樣品沒有混勻。 第三:western blot檢測(cè)，流出液中存在目的蛋白。 各種平衡緩沖液，洗脫液都和上一次純化一樣。但是出現(xiàn)蛋白不掛柱的問題。就大神指導(dǎo)原因何在?不勝感激 @biostar2009 @wizardfan @飛約瘋?cè)嗽?/u> 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2016-07-06 14:15:34
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是部分蛋白在流穿液中。今天和老師討論了一下，說明書以及以往前輩實(shí)驗(yàn)洗脫是在ph值2.5~3.0之間。我檢測(cè)了我的洗脫液是3.17。準(zhǔn)備降低ph值檢測(cè)柱子里面是否有蛋白。十分感謝您 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-07-06 16:33:18
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4樓2016-07-06 16:59:50
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