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fannis金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
HPLC峰的保留位置不一致是什么問(wèn)題？ 已有8人參與
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各位大神， 小弟最近用hplc分離樣品，目前分離到最后只剩了簡(jiǎn)單的幾個(gè)峰，流動(dòng)相是乙腈和水。等梯度洗脫的時(shí)候，峰相對(duì)來(lái)說(shuō)是可以分開(kāi)的，但是每次峰的保留位置總是不太一致，忽前忽后，由于需要單獨(dú)收集單個(gè)峰進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。所以想問(wèn)一下各位，造成這種情況可能的原因是什么？ 稍后上圖。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 我也曾出現(xiàn)過(guò)這樣的情況，當(dāng)時(shí)判斷的原因是流動(dòng)相混合后，溫度不均勻?qū)е碌�，因�(yàn)橐译婧退旌鲜敲黠@吸熱的，導(dǎo)致整個(gè)體系溫度不均勻，進(jìn)一步導(dǎo)致流動(dòng)相體積和比例的不均勻，從而影響重復(fù)性。建議你兩相混勻后走樣，也可以水相用50%乙腈水溶液，這樣配置流動(dòng)相會(huì)比較方便點(diǎn)，然后計(jì)算出相應(yīng)比例走樣。這樣就可以顯著改善重復(fù)性。~這是流動(dòng)相的問(wèn)題，也有可能存在其他原因，諸如儀器比例閥故障、儀器污染等。~歡迎繼續(xù)討論。 |
13樓2016-09-20 17:04:13
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17樓2016-09-22 08:21:47
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2樓2016-09-20 08:44:22
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4樓2016-09-20 10:17:50
fannis
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