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基因組為模板pcr 已有3人參與
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提基因組跑膠在比15000大一點(diǎn)的地方條帶很亮（15000marker），然后以基因組為模板pcr，用的是takara primerstar(premix)，第一次94度預(yù)變性1分鐘，94度變性10s，55度退火5s，72延伸1分鐘，跑膠結(jié)果在750bp左右亮了，第二次98度預(yù)變性3分鐘，98度變性10s，其他不變，跑膠結(jié)果100bp左右亮了，目的條帶1100bp，這是為什么？？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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3樓2016-09-27 22:14:08
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4樓2016-09-27 22:33:25
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5樓2016-09-27 22:41:35
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這個(gè)gc含量還好了，調(diào)整一下退火溫度吧。也可以考慮先用內(nèi)切酶處理一下模板再做擴(kuò)增，選產(chǎn)物上沒有的酶切位點(diǎn)就好。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
6樓2016-09-28 06:13:42
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8樓2016-09-28 08:34:01
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9樓2016-09-28 09:07:49
10樓2016-09-28 10:17:16
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