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nadia926499木蟲 (小有名氣)
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[求助]
CRISPR-Cas9基因突變 已有1人參與
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請問各位大神有木有用CRISPR-Cas9做懸浮細胞基因突變的?能否交流一下。 我用的是cas9蛋白和sgRNA組合的SNP直接與ssODN一起轉(zhuǎn)染的細胞,用了脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(lipo2000)和電轉(zhuǎn)(bio-rad電轉(zhuǎn)儀,可能轉(zhuǎn)染效率也不好)兩種方式,各挑了2塊96孔板,但是均沒有陽性結(jié)果,花了2個月的時間,好難過。求助是不是中間有什么不對的地方?自己覺得大問題應(yīng)該是轉(zhuǎn)染效率很低,有沒有什么好的方法可以借鑒的。或者包病毒? |
木蟲 (小有名氣)
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