 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1446 | 回復(fù): 7 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
quzhongzhi新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
PCR,關(guān)于陰性條帶污染的求助 已有1人參與
|
|
|
我跟導(dǎo)師做的是豬星狀病毒的PCR檢測(cè)，現(xiàn)在在做模板的梯度稀釋，可是老是出現(xiàn)污染，我模板才250bp，陰性條帶卻有2000多bp的污染，重復(fù)了兩遍還是一樣。問(wèn)題是我一個(gè)禮拜之前陰性條帶還好好的，只是重做了一遍割膠回收再稀釋就不行了。稀釋引物母液是在超凈臺(tái)通風(fēng)操作（沒(méi)有紫外燈滅菌），因?yàn)閹熜忠策@么做，他好像沒(méi)有過(guò)這種問(wèn)題，我的引物感覺(jué)真不好說(shuō)，也有可能水，或者2X taq MIX出現(xiàn)問(wèn)題，或者我用的ep管有問(wèn)題。但因?yàn)殛幮杂袟l帶，所以暫時(shí)覺(jué)得模板割膠回收和稀釋應(yīng)該沒(méi)事。想知道有沒(méi)有相似經(jīng)歷的大神，告訴我這么大的片段是由什么引起的。 201704080102.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
一志愿河北工業(yè)大學(xué)0817化工278分求調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
085601材料工程找調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
材料與化工272求調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
085600 286分 材料求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
南京大學(xué)化學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
一志愿北京工業(yè)大學(xué)，324分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
281求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
26申博自薦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分
已經(jīng)有10人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 關(guān)于red重組的問(wèn)題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 關(guān)于原核生物RNA提取，最后總是有基因組殘余問(wèn)題，求幫助
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 關(guān)于PCR拖尾現(xiàn)象
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 想請(qǐng)教一下關(guān)于熒光定量PCR的問(wèn)題
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 關(guān)于質(zhì)粒提取
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于酵母X33電轉(zhuǎn)的問(wèn)題
已經(jīng)有8人回復(fù)
skull123
木蟲(chóng) (正式寫手)
- 應(yīng)助: 33 (小學(xué)生)
- 金幣: 1537.4
- 散金: 250
- 紅花: 17
- 帖子: 503
- 在線: 150.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1207630
- 注冊(cè): 2011-02-21
- 專業(yè): 病原微生物與感染研究與診
這么說(shuō)吧，一旦出現(xiàn)污染，很難搞的，或者你可以去另一個(gè)距離較遠(yuǎn)的沒(méi)有做過(guò)這類實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室做這個(gè)實(shí)驗(yàn)（不要帶現(xiàn)有的儀器，試劑過(guò)去），還有一個(gè)終極武器，合成另一個(gè)部位的引物，擴(kuò)另一個(gè)片段，不擴(kuò)這個(gè)片段了 平常pcr的產(chǎn)物和膠、槍頭、ep管什么的，如果不要了，就把它們泡在5%的84溶液密封罐子中，滿了就直接丟掉，污染的最大源頭是擴(kuò)增產(chǎn)物 |
3樓2017-04-09 15:35:58
2樓2017-04-09 11:26:57
quzhongzhi
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 0.6
- 紅花: 1
- 帖子: 11
- 在線: 5.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3973822
- 注冊(cè): 2015-07-16
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
送紅花一朵 |
我其實(shí)快搞了2個(gè)禮拜了，今天用新配的引物，新滅菌的dd水，新的mix，新滅菌的ep管，再另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室超凈臺(tái)先紫外滅菌，再通風(fēng)配體系，但陰性還是污染了，低濃度下也有非特異性擴(kuò)增，不過(guò)確實(shí)有可能是槍的問(wèn)題，因?yàn)槲覜](méi)換槍，想起來(lái)同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的人最近老是做連接轉(zhuǎn)化（但他們是做植物的），我的污染片段大小也似乎接近T載體，我們的槍又是共用。。。。。。說(shuō)到底，這DNA污染，簡(jiǎn)直懷疑人生。 |
4樓2017-04-09 22:15:24
vincent_hpax
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 447 (碩士)
- 金幣: 20161.6
- 散金: 86
- 紅花: 50
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 4418
- 在線: 295.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3959873
- 注冊(cè): 2015-07-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
5樓2017-04-09 22:31:57
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[碩博家園] 求調(diào)劑 有機(jī)化學(xué)考研356分 +4 | Nadiums 2026-03-25 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 070300化學(xué)354求調(diào)劑 +6 | 101次希望 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +5 | Feisty。 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +4 | 種圣賜 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +13 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 數(shù)一英一271專碩（085401）求調(diào)劑，可跨 +7 | 前行必有光 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分，求調(diào)劑 +5 | 0857求調(diào)劑. 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩274求調(diào)劑 +9 | Li李魚(yú) 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +7 | 宋明欣 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703本科鄭州大學(xué)求調(diào)劑 +3 | nhj_ 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程求調(diào)劑 +9 | 多久上課 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +4 | AZMK 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 272求調(diào)劑 +7 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博 +3 | 加油沖��！ 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 +10 | A-哆啦Z夢(mèng) 2026-03-23 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +10 | 你好明天你好 2026-03-23 | 12/600 |
|
|
|
[考研]
材料學(xué)碩，求調(diào)劑
 6+5
|
糖葫蘆888ll 2026-03-22 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 各位老師您好：本人初試372分 +5 | jj涌77 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求老師收我 +3 | zzh16938784 2026-03-23 | 3/150 |
|