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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » QPCR溶解曲線問題
| 查看: 17925 | 回復: 13 | |||
急躁的小脾氣新蟲 (初入文壇)
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[求助]
QPCR溶解曲線問題
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求助大神。。。 開始我用普通PCR跑了這對引物，也跑了膠，結果還蠻好的，沒有引物二聚體和非特異性，產物長度也是對的，283bp。 但是用QPCR做了之后，大多數溶解曲線出現雙峰，還有的峰的位置都變了。 求大神賜教，我這種情況是樣本被污染了嗎？ AC07F37566F8953944E91A807B6F2A8D.jpg@biostar2009 |
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-04-12 22:13:11
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-04-12 22:13:11
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確切說qPCR條件跟普通pcr條件不一樣，檢測精度也不一樣，經驗告訴我用普通pcr檢測q的不能說明什么問題。另外電泳的檢測靈敏度也可能看不到非特異性擴增產生的條帶，而 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2017-04-10 16:46:38
3樓2017-04-10 16:53:36
5樓2017-04-10 22:21:59
niil
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