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plantst5928銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】低GC含量的模板設(shè)計(jì)引物 已有6人參與
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| 本人最近要做一個(gè)基因的互補(bǔ)，用CDNA為模板區(qū)擴(kuò)增該基因的CDS，但是設(shè)計(jì)的引物一直擴(kuò)不出來，我不停的更換引物，加大長(zhǎng)度，提高TM值等，但是沒有收到有效的結(jié)果，擴(kuò)增的特意性很差。后來我發(fā)現(xiàn)我的模板的GC含量比較低，不到30%。設(shè)計(jì)引物的TM值也不高，我嘗試在酶切微點(diǎn)的額保護(hù)堿基處多加幾個(gè)GC，也不行。對(duì)于GC含量低的模板，大家有什么好方法得到比較特異的擴(kuò)增嗎？ |
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plantst5928
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8樓2010-05-05 18:39:36
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plantst5928
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4樓2010-05-05 14:36:58
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