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[交流]
【求助/交流】western blot中，蛋白經SDSPAGE后不是變性了嗎，怎么還能和一抗結合？ 已有12人參與
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western blot中，蛋白經SDSPAGE后不是變性了嗎？ 天然構想被破壞了，特異性識別位點也被破壞了，怎么還能和一抗結合？ |
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lstt09nk(金幣+2):感謝交流~~ 2010-06-02 17:46:31
spiderboy(金幣+1):好像是做SDS-PAGE，而不是PAGE吧 2010-06-04 11:23:27
lstt09nk(金幣+2):感謝交流~~ 2010-06-02 17:46:31
spiderboy(金幣+1):好像是做SDS-PAGE，而不是PAGE吧 2010-06-04 11:23:27
| 與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。 |
9樓2010-06-02 07:24:54
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