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【求助/交流】18s克隆文庫相關(guān)問題 已有1人參與
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剛接觸這個(gè)行業(yè)不久,最近需要構(gòu)建一個(gè)18srDNA克隆文庫,參考了一些文獻(xiàn)資料,但還是有些問題沒理解,特來請(qǐng)教: 1. 如何選擇質(zhì)粒? 是不是只要pcr產(chǎn)物長(zhǎng)度適合該質(zhì)粒就可以,比如PMD18-T(產(chǎn)物長(zhǎng)約1700bp) 2. 如何去除重復(fù)的陽性克隆子?參考很多意見,貌似大家都認(rèn)為菌落PCR不是很靠譜,所以應(yīng)該會(huì)選用酶切的方法。問題又來了,應(yīng)該如何選擇內(nèi)切酶呢?是應(yīng)該選擇能切開模板的內(nèi)切酶然后根據(jù)酶切譜型來判斷么? 其實(shí)還有好多問題..有沒有高手能指導(dǎo)下,或者介紹下相關(guān)的文獻(xiàn)學(xué)習(xí)下,不勝感激! |
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