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hufen-0328新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助】關(guān)于液相測(cè)氨基酸的問(wèn)題 已有6人參與
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用的是Venusil-AA氨基酸分析法測(cè)定魚(yú)肉中的氨基酸 標(biāo)樣出的色譜圖很好 樣品出峰很少而且很小，加大濃度后還是不行 懷疑是樣品水解過(guò)程中出了問(wèn)題 我的水解方法：0.2g左右的魚(yú)干粉加入5mL6mol/L的鹽酸，抽真空后封口，110度 水解24h 想請(qǐng)問(wèn)做過(guò)的朋友，我的水解過(guò)程有沒(méi)有問(wèn)題?再有就是水解后是什么顏色的?我的呈棕色，發(fā)現(xiàn)我處理的標(biāo)品在放置一天后，顏色由無(wú)色變成了黃色，是不是我的樣品中的氨基酸在水解的過(guò)程中已被氧化了？ |
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hufen-0328
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7樓2010-08-10 08:50:39
pkming
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zxz.1982(金幣+2):感謝交流 2010-08-09 15:05:02
zxz.1982(金幣+2):感謝交流 2010-08-09 15:05:02
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從你描述的情況來(lái)看，水解沒(méi)有問(wèn)題。水解后的顏色我做的也是這樣，棕色，沒(méi)問(wèn)題。如果有黑色沉淀則是碳化了。 酸水解確實(shí)對(duì)某幾種氨基酸有破壞作用。如果你懷疑是水解破壞了大部分氨基酸可以將氨基酸做對(duì)比水解。 水解樣品的后續(xù)處理你是怎樣做的，有沒(méi)有損失？還有會(huì)不會(huì)水解不徹底沒(méi)有將氨基酸釋放出來(lái) [ Last edited by pkming on 2010-8-9 at 14:44 ] |
2樓2010-08-09 14:43:50
hufen-0328
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3樓2010-08-09 15:00:41
pkming
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hufen-0328(金幣+3):專業(yè)，熱心，非常感謝 2010-08-09 15:42:54
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我用的不是方法包，直接用PITC衍生，普通的C18色譜柱。一般衍生是比較穩(wěn)定的，PITC衍生產(chǎn)物比其他衍生又穩(wěn)定些，但是建議現(xiàn)做先衍生（一般都要求這樣），不要超過(guò)1d，否則衍生物不穩(wěn)定。 問(wèn)題我懷疑還是出現(xiàn)在水解這一塊。建議注意一下幾個(gè)方面 1、水解過(guò)程中注意充氮?dú)�，快速封口，做好保護(hù) 2、用混合氨基酸做水解對(duì)比，來(lái)驗(yàn)證水解對(duì)氨基酸的影響， 3、你是直接用水解樣衍生的，這樣不妥。應(yīng)該濃縮一下，還有樣品的PH對(duì)后續(xù)衍生會(huì)影響。（建議對(duì)水解后的樣品做相應(yīng)的處理，我認(rèn)為這是關(guān)鍵） |
4樓2010-08-09 15:16:35
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