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parada0927金蟲(chóng) (小有名氣)
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【轉(zhuǎn)帖】HRP標(biāo)記抗體 已有7人參與
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| 有沒(méi)有人做過(guò)HRP方面的標(biāo)記工作,想咨詢一下各位高手! |
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金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

金蟲(chóng) (小有名氣)

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金蟲(chóng) (小有名氣)

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曾經(jīng)做過(guò)的方法,希望對(duì)你有用: 酶標(biāo)抗體(Ab-HRP)制備采用改良過(guò)碘酸鈉法:10 mg HRP溶于1 mL 蒸餾水,加入新配0.06 mol/L 的過(guò)碘酸鈉溶液1 mL,混勻置冰箱30min,取出后加入0.16 mol/L乙二醇水溶液1mL,于室溫放置30min后加入含20 mg Ab抗體的水溶液4 mL,混勻后透析過(guò)夜,吸出加5 mg/mL NaBH4 溶液0.7mL,混勻置冰箱2h,加等體積飽和硫酸銨溶液,4℃靜置1h后,3 000 r/min低溫離心30min,棄上清。將沉淀用0.02 mol/L pH7.4的PBS溶解后,裝入透析袋中,放入0.02 mol/L pH7.4 的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)中,4℃透析,直至NH4+去除后(奈氏試劑檢測(cè)),10 000 r/min離心30min,收集上清液即得抗體的酶結(jié)合物,加入等量甘油,混勻,分裝,保存于-20℃。 |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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