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parada0927金蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【轉(zhuǎn)帖】HRP標(biāo)記抗體 已有7人參與
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| 有沒(méi)有人做過(guò)HRP方面的標(biāo)記工作，想咨詢一下各位高手！ |
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dianaofyezi
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2樓2010-08-10 10:29:59
parada0927
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liyong1981 
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6樓2010-08-11 15:31:52
dianaofyezi
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7樓2010-08-11 22:18:15
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8樓2010-08-12 10:40:55
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
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曾經(jīng)做過(guò)的方法，希望對(duì)你有用： 酶標(biāo)抗體（Ab-HRP）制備采用改良過(guò)碘酸鈉法：10 mg HRP溶于1 mL 蒸餾水，加入新配0.06 mol/L 的過(guò)碘酸鈉溶液1 mL，混勻置冰箱30min，取出后加入0.16 mol/L乙二醇水溶液1mL，于室溫放置30min后加入含20 mg Ab抗體的水溶液4 mL，混勻后透析過(guò)夜，吸出加5 mg/mL NaBH4 溶液0.7mL，混勻置冰箱2h，加等體積飽和硫酸銨溶液，4℃靜置1h后，3 000 r/min低溫離心30min，棄上清。將沉淀用0.02 mol/L pH7.4的PBS溶解后，裝入透析袋中，放入0.02 mol/L pH7.4 的磷酸鹽緩沖溶液（PBS）中，4℃透析，直至NH4+去除后（奈氏試劑檢測(cè)），10 000 r/min離心30min，收集上清液即得抗體的酶結(jié)合物，加入等量甘油，混勻，分裝，保存于-20℃。 |
9樓2010-08-12 14:45:55
rabbit9355
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10樓2010-08-17 20:06:25
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