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[交流]
【求助/交流】為什么用RT-PCR等實(shí)驗(yàn)方法獲得的mRNA往往缺少完整的5’端？
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為什么用RT-PCR等實(shí)驗(yàn)方法獲得的mRNA往往缺少完整的5’端？ 謝謝~~ |
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2樓2010-08-20 15:11:10
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看天(金幣+1):鼓勵(lì)回答 2010-08-20 20:29:37
adslye(金幣+5):多謝，大概明白了。 2010-08-21 13:28:05
看天(金幣+1):鼓勵(lì)回答 2010-08-20 20:29:37
adslye(金幣+5):多謝，大概明白了。 2010-08-21 13:28:05
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分情況，一般用RT-PCR都是用oligo dT作為引物，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，如果你的mRNA比較長(zhǎng)，或者有比較復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，那很難合成到mRNA 5'短，中間可能就有酶脫落的問(wèn)題。 當(dāng)然，如果你基因比較短或者結(jié)構(gòu)比較簡(jiǎn)單，酶-模板-引物復(fù)合物就可以順利通過(guò)到達(dá)5‘端。 |
3樓2010-08-20 15:58:47
snzydong
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4樓2010-08-20 16:31:40
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