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【求助】求助:請(qǐng)問自動(dòng)進(jìn)樣器怎么自動(dòng)完成OPA-FMOC衍生化方法分析氨基酸?
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請(qǐng)問自動(dòng)進(jìn)樣器怎么自動(dòng)完成OPA-FMOC衍生化方法分析氨基酸? OPA和FMOC衍生法,就是對(duì)氨基酸進(jìn)行一級(jí)和二級(jí)衍生,然后分別在338和262nm檢測(cè)這些分別衍生后的氨基酸,但是,想不明白,怎么讓氨基酸的衍生由自動(dòng)進(jìn)樣器自動(dòng)完成? 進(jìn)樣器吸取樣品,或者吸取衍生化試劑后,就進(jìn)樣了,怎么會(huì)完成衍生化呢? 那位達(dá)人幫給解惑一下? 非常感謝! |
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injector 上面選擇Programmed injection 會(huì)發(fā)現(xiàn)左上角 有各種動(dòng)作可以選 吸取 混合 啥啥的 拿篇參考文獻(xiàn) 照著編 基本上是 洗枕頭 吸取樣品 洗針頭 再吸取 衍生試劑 再混合 反應(yīng)個(gè)1-2分鐘 進(jìn)樣 我發(fā)現(xiàn)的問題是:手動(dòng)進(jìn)樣的峰要比 programmed injection 的峰高 想原因大概是,進(jìn)樣器大概是100 ul的loop,吸取個(gè)幾個(gè)ul的樣來說自然就太不準(zhǔn)了吧 所以我還是手動(dòng)衍生再進(jìn)樣 費(fèi)些藥品而已 |
| 柱前衍生化進(jìn)樣程序(瓶1~5 分別為OPA、FMOC、水、硼酸鹽緩沖液、水):進(jìn)樣針從瓶3 吸取0μl(水,清洗針頭)→從瓶4 吸取5μl(硼酸鹽緩沖液)→從瓶3 吸取0μl(水,清洗針頭)→從瓶1 吸取1μl(OPA)→從瓶3 吸取0μl(水,清洗針頭)→吸取樣品1μl→從瓶3 吸取0μl(水,清洗針頭)→“在空氣中”混合7μl,10 次→從瓶2 吸取1μl(FMOC)→從瓶3 吸取0μl(水,清洗針頭)→“在空氣中”混合8μl,30次→從瓶5 中吸取32μl(水)→“在空氣中”混合20μl,最大速度,2 次→進(jìn)樣。 |
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