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[求助]
安捷倫氨基酸方法包分析氨基酸,RSD偏高怎么辦?
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我們用的是安捷倫氨基酸方法包,按照方法包中的說明是: A相-40mM磷酸氫二鈉(pH7.8);B相-甲醇:乙腈:水(45:45:10),梯度洗脫 其余都是按照方法包中的說明進(jìn)行操作的,用17種標(biāo)準(zhǔn)氨基酸混合液(商品,濃度1nmol/ul)分6個批次進(jìn)行分析。 現(xiàn)在的問題是: 1.先說保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),我的結(jié)果是:17種氨基酸的平均RSD在1.09%,而說明書上關(guān)于峰面積的平均RSD為0.18%; 2.再說峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),我的結(jié)果是:17種氨基酸的平均RSD在13.08%,而說明書上關(guān)于峰面積的平均RSD為2.0%左右。 結(jié)論是我的操作時說明書上相對偏差的10倍左右 請教:問題會出在哪里?以后操作時該注意那些事情? |
銀蟲 (小有名氣)
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agilent和water都有自己的氨基酸分析方法包,我做過waters的,估計和agilent的差不多,都是柱前衍生吧? 從我上千次的操作經(jīng)驗來看,這么儀器公司提供的所謂重現(xiàn)性很好的方法包,根本就重復(fù)不出廠家所說的結(jié)果出來。樓主能夠做到峰面積的RSD在13%已經(jīng)不錯了。你要是比較次與次之間的偏差,會發(fā)現(xiàn)更大。 |
木蟲 (正式寫手)
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