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安捷倫氨基酸方法包分析氨基酸，RSD偏高怎么辦？
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我們用的是安捷倫氨基酸方法包，按照方法包中的說明是： A相-40mM磷酸氫二鈉（pH7.8）；B相-甲醇：乙腈：水（45：45：10），梯度洗脫 其余都是按照方法包中的說明進(jìn)行操作的，用17種標(biāo)準(zhǔn)氨基酸混合液（商品，濃度1nmol/ul）分6個(gè)批次進(jìn)行分析。 現(xiàn)在的問題是： 1.先說保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，我的結(jié)果是：17種氨基酸的平均RSD在1.09%，而說明書上關(guān)于峰面積的平均RSD為0.18%； 2.再說峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，我的結(jié)果是：17種氨基酸的平均RSD在13.08%，而說明書上關(guān)于峰面積的平均RSD為2.0%左右。 結(jié)論是我的操作時(shí)說明書上相對(duì)偏差的10倍左右 請(qǐng)教：問題會(huì)出在哪里？以后操作時(shí)該注意那些事情？ |
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agilent和water都有自己的氨基酸分析方法包，我做過waters的，估計(jì)和agilent的差不多，都是柱前衍生吧？ 從我上千次的操作經(jīng)驗(yàn)來看，這么儀器公司提供的所謂重現(xiàn)性很好的方法包，根本就重復(fù)不出廠家所說的結(jié)果出來。樓主能夠做到峰面積的RSD在13%已經(jīng)不錯(cuò)了。你要是比較次與次之間的偏差，會(huì)發(fā)現(xiàn)更大。 |
3樓2012-08-18 07:47:40
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4樓2012-08-18 20:55:16
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