 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4099 | 回復: 3 | ||||
[交流]
【求助/交流】請教試劑瓶等滅菌的包裝
|
|
本人是學化學的，沒有接受過正規(guī)的細胞培養(yǎng)操作培訓，想請教一些關于細胞培養(yǎng)問題，期生物的同學能給解答疑問，多謝！ 1. 像玻璃培養(yǎng)瓶，藍蓋試劑瓶之類的，高壓滅菌前要怎樣包裝呢？如果只是把瓶口稍微擰松讓蒸汽進去等滅菌結束后直接把瓶蓋擰緊，那么瓶內蒸汽冷凝后形成的水珠怎么辦呢？放在鼓風干燥箱里烘干的話怎么保證箱體內的空氣不會導致滅過的瓶子二次污染呢？看到有人說用8層紗布，要整體都包住嗎？這樣的話大的1L的藍蓋瓶豈不是要專門縫個紗布袋了？ 2. 分裝培養(yǎng)基的時候，是在過膜之前先用量筒分裝成200 mL等不同的體積后再過濾嗎？因為濾過之后又要一批瓶子，這樣每次都要準備兩個批量的瓶子，是這樣嗎？另外，把這些分裝好后的瓶子噴過酒精直接拿到超凈臺里進行過濾操作，這樣打開瓶口后，瓶內的細菌不就留在超凈臺內了嗎？ 3. 那些國產(chǎn)的針頭濾器，據(jù)說可以重復利用，是直接把微孔濾膜裝在濾器后用紗布之類的包好放在滅菌鍋里滅菌，然后就可以直接濾胰酶之類的了嗎？因為是新手，一切還在學習階段，實驗室經(jīng)費也不是很寬裕，不好意思剛開始就拿那種無菌包裝的練習。 4. 四季青的血清要滅活嗎？看網(wǎng)上搜出來的結果是各式各樣的，我們主要是用來做傳代細胞的培養(yǎng)，大多是腫瘤細胞。 5. 細胞凍存是不是只在-80度冰箱就可以短期保存，比如2~3個月之久。凍存細胞的液氮罐記得都有能放凍存管的格子，跟化學用的不大一樣，應該買什么樣的液氮罐啊，什么廠家產(chǎn)的好呢？ |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 細胞 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有91人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有16人回復
-
化學工程，本211，求調劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調劑
已經(jīng)有0人回復
-
湖北師范大學招調劑啦
已經(jīng)有3人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 請教中文SCI《有機化學》和《化學學報》的收費情況
已經(jīng)有12人回復
- 請教國內大學的助理研究員如何翻譯?謝謝!
已經(jīng)有7人回復
- 請教fluent數(shù)據(jù)導出功能 溫度場
已經(jīng)有15人回復
- 請教 DSC 圖譜解析
已經(jīng)有5人回復
- 請教氣相色譜達人們？
已經(jīng)有5人回復
- 請教一個高分子溶解的問題~~~
已經(jīng)有9人回復
- 請教高手: LJ勢中的指數(shù)只能是6-12嗎？
已經(jīng)有4人回復
- 阿拉丁、百靈威、Sigma等試劑公司封試劑瓶用的膠帶
已經(jīng)有7人回復
- 【求助/交流】請教有關滅菌的問題
已經(jīng)有20人回復
- 電轉化注意事項
已經(jīng)有14人回復
- 【請教】液體試劑瓶標簽上的百分含量指什么
已經(jīng)有12人回復
- 【請教】壓電陶瓷
已經(jīng)有29人回復
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
環(huán)境科學/環(huán)境工程專業(yè)，江蘇
+1/88
-
2026江西科技師范大學申亮組招碩士研究生
+1/86
-
福建師范大學招收2026年化學、材料碩士3-4名
+1/84
-
歡迎調劑到贛南師范大學智能制造與未來能源學院
+2/80
-
接工學跨專業(yè)調劑學生，非誠勿擾，謝謝
+1/48
-
撿漏
+1/43
-
上海應用技術大學化工學部2026年招收化工和化學類調劑生
+1/39
-
2026長江大學基礎醫(yī)學招收調劑生
+1/37
-
誠聘博士后 | 26年華東師大海優(yōu)課題組——多相催化方向：CO₂資源化與廢塑料轉化
+1/37
-
【博士招生】天津理工大學國家杰青王鐵課題組招收2026年博士研究生
+1/10
-
南京林業(yè)大學化工院有機合成方向碩士招調劑
+1/9
-
聚焦心力衰竭和動脈粥樣硬化機制研究｜國家老年醫(yī)學中心心血管疾病科研團隊 學術成果
+1/8
-
華東師范大學-分析化學-招收1名博士研究生 (2026年，第二批)
+1/7
-
【博士招生】廣東工業(yè)大學國家優(yōu)青課題組招收2026年環(huán)境方向博士生
+1/6
-
博士招生 | 青島科技大學（高分子、化學、材料、力學、機電工程、計算機仿真）
+1/6
-
青島大學學碩調劑！
+1/6
-
同濟大學環(huán)境學院 肖倩特聘研究員課題組 招聘碩士/博士（長期有效）
+1/5
-
材料科學與工程學院招生
+1/5
-
2026年云南大學青拔課題組招收地理學，大氣科學、資源與環(huán)境等專業(yè)研究生
+1/5
-
2026年北京石油化工學院環(huán)境學科-水污染控制工程方向課題組歡迎您
+1/2
★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金幣+5):感謝回復，歡迎常來生物版做客 2010-11-22 16:54:14
mmsong1987(金幣+10):謝謝，以后還請多指教！ 2010-11-22 19:26:51
lstt09nk(金幣+5):感謝回復，歡迎常來生物版做客 2010-11-22 16:54:14
mmsong1987(金幣+10):謝謝，以后還請多指教！ 2010-11-22 19:26:51
|
你問我答： 1.我們滅菌這些瓶子的時候包六層紗布加報紙或者只包報紙，包住瓶蓋就行了。滅菌后在超凈臺吹干，第二天過濾培養(yǎng)基加入瓶中。瓶蓋擰松后空氣中的污染是不會進入瓶內的，否則怎么敢在培養(yǎng)細胞的時候擰松瓶蓋呢？若是培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)瓶，可以4～6個一組包于報紙中，烘箱烘干即可。 2.我不明白樓主干嘛準備兩批瓶子。過濾前的瓶子不需要無菌，只要保證過濾后裝培養(yǎng)基的瓶子無菌就行。也可以不拿進超凈臺，每次吸到注射器里面，把注射器拿進去不就行了？ 3.我們使用的國產(chǎn)針頭濾器，裝了濾膜后放在鋁制飯盒內，用報紙包好飯盒拿去滅菌的。滅菌后烘干使用。 4.四季青的血清我們是滅活的，水浴56攝氏度30分鐘。 5.－80度可以保存細胞一陣，但還是推薦液氮。液氮罐可以用Thermo什么的，質量一定要好。不然幾十上百升液氮泄露，也很恐怖的。 [ Last edited by Rubisco580 on 2010-11-22 at 16:39 ] |
2樓2010-11-22 16:36:12
|
非常感謝你的回答，學習了很多，還是有些細節(jié)問題想確認一下 裝濾過的培養(yǎng)基的試劑瓶瓶口是先用六層紗布包好最外層再用報紙嗎？從滅菌鍋里取出后直接放到超凈臺吹干嗎？從滅菌鍋到超凈臺的途中有什么注意事項呢？瓶蓋一直是擰松狀態(tài)嗎？ 玻璃培養(yǎng)瓶的瓶蓋也是瓶口用6層紗布包好然后4~6個一組用報紙之類的包下滅菌，滅完了之后直接取出放烘箱中烘干？瓶口的蓋子也是一直旋松狀態(tài)的？烘干之后蓋子該旋緊了吧？ 關于培養(yǎng)基的過濾，我們用的是別的老師送的一個不銹鋼正壓濾器，我每次是直接拿用量筒分裝好的裝培養(yǎng)基的藍蓋試劑瓶外面噴點酒精然后直接導入濾器中的，然后用一個加壓球（血壓球，就是跟量血壓用的那個差不多，流速還行）加壓讓濾液流出的，出口是滅過的瓶子。不知道你說的“也可以不拿進超凈臺，每次吸到注射器里面，直接注射器進去”有些不解？培養(yǎng)基一次都配1L，用注射器加針頭濾器不是很慢嗎？ 另外，懷疑染菌的加過血清的培養(yǎng)基除了扔掉還有別的補救措施沒？ |
3樓2010-11-22 19:25:41
mmsong1987(金幣+10):謝謝 2010-11-23 10:41:10
|
六層紗布和報紙在一起，大小一樣或者報紙大一點，然后橡皮筋捆緊。滅菌后取出時擰緊與否關系不大，剛拿出來很燙還是別擰了。在超凈臺里面吹的時候也是擰松的。 玻璃培養(yǎng)瓶瓶口無需包紗布，只要這組瓶子都包在報紙里面就行。瓶蓋一直是松的，包括養(yǎng)細胞的時候，不然細胞憋死了……當然，你觀察細胞的時候擰緊，免得灑了。 注射器用在胰酶之類的體積不太大的液體滅菌。進過濾器前的東西，不需要刻意噴酒精，因為你的培養(yǎng)基也不是無菌的嘛。我們也用的正壓濾器，用長的塑料管將培養(yǎng)基導入濾器。我們的培養(yǎng)基是放在2L燒杯里的，燒杯就放在超凈臺外面。如果你的導管夠長，也可以這么做。 懷疑染菌的培養(yǎng)基可以取一點在培養(yǎng)瓶中養(yǎng)，看看會不會長菌。補救措施嘛，加抗生素或許可以，但是不推薦，還是扔掉保險，萬一處理的不夠干凈污染了細胞就麻煩了。 |
4樓2010-11-23 10:01:14
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 mmsong1987 的主題更新
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 福建理工大學材料學院先進合金團隊招收考研調劑學生 +3 | 大華金商都 2026-03-30 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 281求調劑 +5 | 亞克西good 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 286分調劑 +10 | Faune 2026-03-30 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿：西北大學，英一數(shù)一408-284分求調劑 +5 | 12.27 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 08工科，295，接受跨專業(yè)調劑 +3 | lmnlzy 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調劑：一志愿湖南大學 材料與化工（085600），已過六級。 +9 | XX小鄧 2026-03-29 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 342求調劑 +4 | 加油a李zs 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學/290求調劑/本科經(jīng)歷豐富/工科也可 +13 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 085602 化學工程專碩 340分求調劑 +4 | qianbai11 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 070305高分子化學與物理 304分求調劑 +12 | c297914 2026-03-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 291求調劑 +5 | Y-cap 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 332求92調劑 +8 | 蕉蕉123 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿華理，數(shù)一英一285求A區(qū)調劑 +8 | AZMK 2026-03-25 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調劑 +4 | 零八# 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學碩求調劑 +3 | 崔wj 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
材料調劑
5+4
|
想要一壺桃花水 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 309求調劑 +4 | gajsj 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 機械學碩總分317求調劑�。。。� +4 | Acaciad 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 085404電子信息284分求調劑
+4
|
13659058978 2026-03-24 | 4/200 |
|