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maxwell1988金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】關(guān)于PCR產(chǎn)物的突變 已有4人參與
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我是個剛進(jìn)入分子克隆實(shí)驗(yàn)的菜鳥。前段時間剛從外周血細(xì)胞中提取了其總RNA，再進(jìn)行RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。以該cDNA作為模板，進(jìn)行常規(guī)的PCR。之后就是簡單的割膠回收，TA克隆。 送去測序后，連續(xù)幾次得到的結(jié)果都是在目的基因序列的3'端大概9個堿基處，多了一個同樣的一個堿基。 如果是突變，那么為什么會在同樣的地方出現(xiàn)同樣的情況？如果是模板的問題，為什么以該模板做的其他PCR產(chǎn)物拿去測序卻完全正確？會不會是TA克隆出了什么問題？請高手們多多指教！  |
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8樓2010-12-06 16:35:15
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