 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1652 | 回復(fù): 7 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
maxwell1988金蟲 (小有名氣)
|
[交流]
【求助/交流】關(guān)于PCR產(chǎn)物的突變 已有4人參與
|
||
|
我是個(gè)剛進(jìn)入分子克隆實(shí)驗(yàn)的菜鳥。前段時(shí)間剛從外周血細(xì)胞中提取了其總RNA，再進(jìn)行RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。以該cDNA作為模板，進(jìn)行常規(guī)的PCR。之后就是簡(jiǎn)單的割膠回收，TA克隆。 送去測(cè)序后，連續(xù)幾次得到的結(jié)果都是在目的基因序列的3'端大概9個(gè)堿基處，多了一個(gè)同樣的一個(gè)堿基。 如果是突變，那么為什么會(huì)在同樣的地方出現(xiàn)同樣的情況？如果是模板的問(wèn)題，為什么以該模板做的其他PCR產(chǎn)物拿去測(cè)序卻完全正確？會(huì)不會(huì)是TA克隆出了什么問(wèn)題？請(qǐng)高手們多多指教！  |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有126人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 點(diǎn)突變，自己設(shè)計(jì)互補(bǔ)的突變引物做PCR，這個(gè)PCR產(chǎn)物是怎么鑒定？是線性的還是環(huán)狀的？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- PCR ， 雙酶切，連接問(wèn)題
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR產(chǎn)物測(cè)序出現(xiàn)雜峰過(guò)多的問(wèn)題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【分享】關(guān)于載體雙酶切的一些經(jīng)驗(yàn)
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教關(guān)于大腸桿菌lamda RED重組問(wèn)題
已經(jīng)有23人回復(fù)
rainwander
鐵桿木蟲 (知名作家)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 貴賓: 2.598
- 金幣: 9923.3
- 散金: 767
- 紅花: 40
- 沙發(fā): 42
- 帖子: 8072
- 在線: 643.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 676169
- 注冊(cè): 2008-12-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物學(xué)
4樓2010-12-06 13:49:28
won7
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 954
- 散金: 55
- 帖子: 297
- 在線: 61.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 19911
- 注冊(cè): 2003-07-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 水產(chǎn)資源與保護(hù)學(xué)
★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
silicare(金幣+1):謝謝參與 2010-12-06 12:13:01
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
silicare(金幣+1):謝謝參與 2010-12-06 12:13:01
|
不太明白，你怎么確定哪個(gè)位置是一個(gè)突變，而不是真實(shí)的堿基呢？盡管PCR因?yàn)槊傅膯?wèn)題會(huì)有錯(cuò)配，但幾次PCR、測(cè)序都是相同的話，應(yīng)該可以確定是真實(shí)堿基了，但是如果你是用同樣的克隆，測(cè)序幾次，都相同就沒有什么問(wèn)題，說(shuō)明測(cè)序沒有問(wèn)題。 [ Last edited by won7 on 2010-12-6 at 11:17 ] |
2樓2010-12-06 11:15:47
ben1147
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 18 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.003
- 金幣: 5847.6
- 紅花: 6
- 帖子: 952
- 在線: 116.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 709538
- 注冊(cè): 2009-02-26
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
3樓2010-12-06 12:22:20
maxwell1988
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1038.7
- 散金: 20
- 紅花: 3
- 帖子: 103
- 在線: 35.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 883233
- 注冊(cè): 2009-10-25
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2010-12-06 15:25:18
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 083000學(xué)碩274求調(diào)劑 +5 | Li李魚 2026-03-26 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 小木蟲085600 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿211院校 344分 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)學(xué)碩，求調(diào)劑 +5 | 丶風(fēng)雪夜歸人丶 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +4 | jhx777 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 26申博 +3 | 加油沖啊！ 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +6 | 墨墨漠 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +8 | @taotao 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +5 | 江辭666 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +7 | 鈕恩雪 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +13 | Faune 2026-03-21 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 材料277求調(diào)劑 +5 | min3 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京郵電大學(xué) 288分 材料考研 求調(diào)劑 +3 | jl0720 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 打過(guò)很多競(jìng)賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 07化學(xué)303求調(diào)劑 +5 | 睿08 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +7 | 加一一九 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 324 +4 | Promise-jyl 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿國(guó)科過(guò)程所081700，274求調(diào)劑 +3 | 三水研0水立方 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué)070300 學(xué)碩336求調(diào)劑 +5 | vv迷 2026-03-21 | 8/400 |
|