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[交流]
【求助/交流】PCR沒有條帶 已有8人參與
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大家好，我是個(gè)剛做分子的新人，PCR有些還不太明白，請(qǐng)教大家。 最近我跑PCR，兩對(duì)引物，第一對(duì)，一跑就出了目標(biāo)條帶，第二對(duì)跑了很多次，死活跑不出東西來。大家?guī)臀曳治鱿�，問題可能出在哪里？ 引物設(shè)計(jì)沒問題，很多人都用這對(duì)引物。我按照文獻(xiàn)的各種方法都跑了，漸變溫的，恒溫的。開始懷疑引物出問題了，放了很長時(shí)間了，但這兩天又用新配的引物也還是跑不出來。我也試著改變DNA模板濃度跑了，也沒跑出任何東西來。 老板告訴我的信息是，肯定能跑出來，我們?cè)囼?yàn)室畢業(yè)了的人跑過，再就是確實(shí)不好跑出來，第一對(duì)引物比較好跑出來，第一對(duì)跑出來了但第二對(duì)引物不一定能跑出來。他的意思是不是DNA模板可能有問題？純度不夠？ 大家?guī)臀曳治鱿拢业膶?shí)驗(yàn)過程中可能哪些地方出了問題，該怎么解決這些問題，謝謝了！  這是第一對(duì)引物跑的圖  這是第二對(duì)引物跑的，跑出應(yīng)該是同第一對(duì)的差不多，都應(yīng)該是300多bp的片段 （另外弱弱的問一下，最下面那條帶是什么？引物？引物二聚體？） 謝謝大家了！ [ Last edited by napzy on 2010-12-16 at 18:49 ] |
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