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[交流]
【求助/交流】急！克隆快做了一個(gè)月了，就是做不出來(lái) 已有20人參與
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TA 克隆 載體：pMD 18-T(Takara) 感受態(tài)：DH5a (天根) 實(shí)驗(yàn)流程是基本按照分子克隆上說(shuō)的 PCR產(chǎn)物做了純化，由于濃度比較低，所以 載體：0.5ul PCR產(chǎn)物：4.5ul Solution I: 5ul 14-16°連接過(guò)夜 轉(zhuǎn)化用100ul的感受態(tài)細(xì)胞 熱激什么的都沒(méi)有問(wèn)題，復(fù)蘇后濃縮成100ul全部涂板，但是就是不長(zhǎng)東西。做了陽(yáng)性對(duì)照，也沒(méi)長(zhǎng)。好奇怪啊，不知道是哪里出了問(wèn)題。 |
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9樓2010-12-29 16:47:25
susizheng
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amisking(金幣+2):鼓勵(lì) 2010-12-28 19:42:26
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amisking(金幣+2):鼓勵(lì) 2010-12-28 19:42:26
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先轉(zhuǎn)個(gè)空質(zhì)�？纯锤惺軕B(tài)是否有問(wèn)題先。 如果感受態(tài)沒(méi)問(wèn)題，陽(yáng)性對(duì)照都不長(zhǎng)，應(yīng)該要考慮盒子的問(wèn)題了。 再就是你的片段多大？超過(guò)3K，pMD18-T連起來(lái)就有點(diǎn)難度了。 [ Last edited by susizheng on 2010-12-28 at 14:09 ] |
2樓2010-12-28 14:08:49
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3樓2010-12-28 14:18:43
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4樓2010-12-28 15:26:09
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