 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1932 | 回復(fù): 2 | |||
[交流]
【求助/交流】請(qǐng)問(wèn)一下畢赤酵母胞外表達(dá)載體pPICZaA線性化的問(wèn)題 已有2人參與
|
| 請(qǐng)問(wèn)一下：我用畢赤酵母胞外表達(dá)載體pPICZaA，已經(jīng)克隆好了，后面做轉(zhuǎn)化之前要先用Sac1或者Bst X1兩種酶進(jìn)行線性化，可我老是切不出來(lái)，這是怎么回事呢？按說(shuō)單酶切應(yīng)該很容易的，質(zhì)粒我也用試劑盒提過(guò)，不管手工還是試劑盒都切過(guò)，都不行，切了好多次，原始質(zhì)粒和酶切質(zhì)粒跑膠看起來(lái)沒(méi)差別，像是在一條線上，這是為什么呢？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
306求0703調(diào)劑一志愿華中師范
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
一志愿吉大化學(xué)322求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
344求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿哈工大，085400，320，求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
【考研調(diào)劑】化學(xué)專業(yè) 281分，一志愿四川大學(xué)，誠(chéng)心求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
307求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
【雙一流院校新能源、環(huán)境材料，材料加工與模擬招收大量調(diào)劑】
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
26申博自薦
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
資源與環(huán)境 調(diào)劑申請(qǐng)(333分)
已經(jīng)有6人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 求助，用氧化石墨烯修飾電極后物質(zhì)氧化峰并未明顯增加
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 請(qǐng)問(wèn)一些關(guān)于《工業(yè)微生物》雜志的問(wèn)題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 巰基化后形成多多聚體
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 在線等老師指點(diǎn)關(guān)于NBS溴化的問(wèn)題
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 硫酸亞鐵溶液ph的問(wèn)題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 請(qǐng)教關(guān)于溫度變化的問(wèn)題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 聚氨酯預(yù)聚過(guò)程中變黃，乳化后成淡淡的咖啡色問(wèn)題。
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【課件】非線性光學(xué)（中科院研究生院）
已經(jīng)有146人回復(fù)
- 畢赤酵母表達(dá)問(wèn)題求教
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 由于語(yǔ)法問(wèn)題，編輯要求回稿修改，并要告訴他怎么改的，請(qǐng)問(wèn)回信該放coverletter里嗎
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)子囊孢子的數(shù)量問(wèn)題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 畢赤酵母表達(dá)過(guò)程中線性化DNA去磷酸化的問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 求助畢赤酵母電轉(zhuǎn)化問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】用畢赤酵母表達(dá)載體pPIC9K表達(dá)蛋白時(shí)分子量的估計(jì)？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】畢赤酵母胞外表達(dá)上清無(wú)活性，但胞內(nèi)測(cè)得活性，WHY?
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】畢赤酵母表達(dá)胞外蛋白，sds電泳后看不到條帶
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)問(wèn)畢赤酵母胞外胞外表達(dá)有酶活不蛋白，正常嗎？
已經(jīng)有8人回復(fù)
fxtch
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 3560.5
- 帖子: 114
- 在線: 108.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 921689
- 注冊(cè): 2009-12-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2010-12-31 11:27:54
落明逐暗
金蟲 (正式寫手)
好吃嘴班班長(zhǎng)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 13196.2
- 散金: 4
- 帖子: 421
- 在線: 99.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 742854
- 注冊(cè): 2009-04-08
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物與生化藥學(xué)
★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+1): 鼓勵(lì)交流，歡迎常來(lái)生物版 2011-03-01 18:28:36
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+1): 鼓勵(lì)交流，歡迎常來(lái)生物版 2011-03-01 18:28:36
|
呃，不是還有PmeI嗎？樓主可以用這個(gè)試一下吧，NEB的酶比較有保障。我也是這個(gè)質(zhì)粒，用了XbaI和XhoI，單酶切和雙酶切都做過(guò)，效果很好（雖然這兩個(gè)不是線性化用途）。 另外，LZ怎么確定沒(méi)線性好的？只是跟原始比對(duì)嗎？問(wèn)題是質(zhì)粒本身就會(huì)有很多形態(tài)出現(xiàn)，還是跟同樣是線性的Marker比較要好一點(diǎn)吧？ |
3樓2011-03-01 14:52:22
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 曉想 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考博] 26申博自薦 +3 | whh869393 2026-03-24 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 361求調(diào)劑 +3 | Glack 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 336化工調(diào)劑 +4 | 王大坦1 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 接收2026碩士調(diào)劑(學(xué)碩+專碩) +4 | allen-yin 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 冬十三 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010，總分320求調(diào)劑 +5 | 困困困困坤坤 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +8 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 尋找調(diào)劑 +4 | 倔強(qiáng)芒? 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué)070300 學(xué)碩336求調(diào)劑 +5 | vv迷 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)071000，求調(diào)劑 +4 | 沿岸有貝殼6 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 一志愿東華大學(xué)控制學(xué)碩320求調(diào)劑
+3
|
Grand777 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩 348分求調(diào)劑 +3 | 冬辭. 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +4 | www_q 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 白QF 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 083200學(xué)碩321分一志愿暨南大學(xué)求調(diào)劑 +3 | innocenceF 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料 336 求調(diào)劑 +3 | An@. 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿南京航空航天大學(xué)289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【同濟(jì)軟件】軟件（085405）考研求調(diào)劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦 +3 | Eember. 2026-03-17 | 9/450 |
|