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seanloveu木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助】請(qǐng)教，DPPH 已有4人參與
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請(qǐng)教一般做DPPH清除自由基，對(duì)照的VC需要幾個(gè)梯度濃度，每個(gè)濃度具體是多少？謝謝 [ Last edited by lovibond on 2011-10-2 at 18:30 ] |
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紅景天水
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2樓2011-01-18 16:07:01
junwen6516
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稱取DPPH粉末0.0079g，用無水乙醇溶解DPPH粉末，并定容至100 mL，配制成最終濃度為20 µmol/L的DPPH乙醇溶液，放置于棕色瓶中，并保存在暗處備用。將樣品稀釋適當(dāng)倍數(shù)，使樣品進(jìn)行分析時(shí)其吸光值最好在0.7以下為準(zhǔn)。首先，取1 mL DPPH乙醇溶液與2 mL已稀釋適當(dāng)倍數(shù)的樣品溶液在具塞試管中混合，混合后及時(shí)放置暗處，室溫進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)進(jìn)行30 min后，取混合液倒入玻璃比色皿中，測(cè)定其在517nm處的吸光值，同時(shí)利用無水乙醇進(jìn)行空白試驗(yàn)，平行試驗(yàn)三次。為了方便考察樣品對(duì)DPPH自由基清除的能力，使用Trolox作為標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行對(duì)照，制作Trolox標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品的Trolox當(dāng)量。 采用系列Trolox溶液（0 µmol/L、4 µmol/L、8 µmol/L、12 µmol/L、16 µmol/L和20 µmol/L）代替樣品溶液，采用與樣品溶液相同步驟，分別測(cè)定不同濃度的Trolox反應(yīng)后在測(cè)定后517nm處的吸光值，根據(jù)其濃度與所得的吸光值的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于計(jì)算樣品的半抑制率IC50即自由基清除率為50%時(shí)所需的樣品濃度。DPPH自由基清除率的計(jì)算公式如下： 式中，A517空白為空白樣在517 nm處的吸光值，A517樣品為待測(cè)樣在517 nm處的吸光值。 |
3樓2011-01-18 20:55:07
seanloveu
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4樓2011-01-18 22:16:07
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5樓2012-12-21 22:14:53
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