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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 專業(yè)學科區(qū) » 食品 » 實驗室分析、儀器 » 【求助】請教，DPPH
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[交流]
【求助】請教，DPPH 已有4人參與
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請教一般做DPPH清除自由基，對照的VC需要幾個梯度濃度，每個濃度具體是多少？謝謝 [ Last edited by lovibond on 2011-10-2 at 18:30 ] |
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4樓2011-01-18 22:16:07
紅景天水
木蟲 (正式寫手)
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2樓2011-01-18 16:07:01
junwen6516
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
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稱取DPPH粉末0.0079g，用無水乙醇溶解DPPH粉末，并定容至100 mL，配制成最終濃度為20 µmol/L的DPPH乙醇溶液，放置于棕色瓶中，并保存在暗處備用。將樣品稀釋適當倍數(shù)，使樣品進行分析時其吸光值最好在0.7以下為準。首先，取1 mL DPPH乙醇溶液與2 mL已稀釋適當倍數(shù)的樣品溶液在具塞試管中混合，混合后及時放置暗處，室溫進行反應，反應進行30 min后，取混合液倒入玻璃比色皿中，測定其在517nm處的吸光值，同時利用無水乙醇進行空白試驗，平行試驗三次。為了方便考察樣品對DPPH自由基清除的能力，使用Trolox作為標準物進行對照，制作Trolox標準曲線，計算樣品的Trolox當量。 采用系列Trolox溶液（0 µmol/L、4 µmol/L、8 µmol/L、12 µmol/L、16 µmol/L和20 µmol/L）代替樣品溶液，采用與樣品溶液相同步驟，分別測定不同濃度的Trolox反應后在測定后517nm處的吸光值，根據(jù)其濃度與所得的吸光值的關系繪制標準曲線，用于計算樣品的半抑制率IC50即自由基清除率為50%時所需的樣品濃度。DPPH自由基清除率的計算公式如下： 式中，A517空白為空白樣在517 nm處的吸光值，A517樣品為待測樣在517 nm處的吸光值。 |
3樓2011-01-18 20:55:07
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5樓2012-12-21 22:14:53
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