 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3560 | 回復(fù): 7 | |||
liuan6126鐵桿木蟲 (正式寫手)
|
[交流]
【求助/交流】酵母PRS整合表達(dá)質(zhì)粒使用的問題，我需要你的幫助，謝謝 已有4人參與
|
|
我想在營養(yǎng)缺陷型酵母CEN.PK2-1C(MATa; ura3-52; trp1-289; leu2-3,112; his3Δ 1; MAL2-8C; SUC2)中整合表達(dá)幾個基因，手頭有pRS303，pRS304,pRS305，pRS306等質(zhì)粒。 我現(xiàn)在存在一個很大的疑惑，即：我能不能先用其中一個質(zhì)粒（假設(shè)為pRS303）表達(dá)一個基因，構(gòu)建一株菌，命名A吧。我是不是可以繼續(xù)使用另外三個質(zhì)粒，繼續(xù)整合表達(dá)新的基因到A中，這樣最后，我可以在一株菌內(nèi)，整合表達(dá)四個基因了。 這個問題的疑惑之處在于，我不是很確定，在后一個基因表達(dá)后，會不會破壞前面整合上去的基因呢？ 謝謝大家，這個問題對我很重要，請不吝賜教。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有161人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 酵母雙雜求助-質(zhì)粒在酵母中的表達(dá)（Gal4系統(tǒng)）
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 釀酒酵母破胞問題求助
已經(jīng)有21人回復(fù)
- pRS416GAL質(zhì)粒的DNA序列
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 求助一下，關(guān)于基因命名
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 求助——質(zhì)粒構(gòu)建問題
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 如何定位質(zhì)粒整合到基因組的位點(diǎn)
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 雙質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)入酵母細(xì)胞
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 如何確定基因位點(diǎn)
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 整合型質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 找老外要質(zhì)粒，沒有聯(lián)邦快遞賬號不給寄，幫幫我
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 水稻Os4cl2的組織特異性表達(dá)研究——Os4cl2啟動子載體構(gòu)建
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 求pSilencer 4.1-CMV 質(zhì)粒的說明書
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 新手：請問怎么查找質(zhì)粒全基因組序列，pRR88，psp72,pcDNA3.1
已經(jīng)有8人回復(fù)
- UASB的HRT問題
已經(jīng)有5人回復(fù)
- pHT304質(zhì)粒的全序列
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 做好的質(zhì)粒如果用完了，用怎樣的步驟繁殖新的，保證質(zhì)粒的質(zhì)量啊？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 做過RNAi或者實(shí)時定量的同學(xué)請幫助我解決一個問題，感激不盡
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 質(zhì)粒pCAMBIA1300轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌EHA105中的問題？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 啤酒酵母質(zhì)粒轉(zhuǎn)化求助
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于PEt-28a質(zhì)粒載體表達(dá)蛋白質(zhì)的問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】求助含發(fā)光基因的質(zhì)粒~不動桿菌中表達(dá)的最好~
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于質(zhì)粒構(gòu)建與表達(dá)的問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 質(zhì)粒繪圖及克隆流程圖不再發(fā)愁，全新免費(fèi)中文版軟件NoeClone幫你完美快速完成
已經(jīng)有71人回復(fù)
susizheng
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 130 (高中生)
- 貴賓: 0.008
- 金幣: 4738.3
- 散金: 2273
- 紅花: 56
- 帖子: 2308
- 在線: 740.7小時
- 蟲號: 642666
- 注冊: 2008-11-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 有機(jī)合成
★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
|
剛剛查了下你系統(tǒng)的信息，pRS303，pRS304,pRS305，pRS306的篩選標(biāo)記分別是His，TRP，LEU，URA，分別與宿主的營養(yǎng)缺陷型互補(bǔ)，所以篩選標(biāo)記方面不存在什么問題，可以實(shí)現(xiàn)你的實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?br />
另外不知道你整合位點(diǎn)是怎么選擇的， 如果擔(dān)心后一個基因整合會影響前一個基因，你可以全部選在篩選標(biāo)記處將載體線性化，那么整合整合分別選擇His，TRP，LEU，URA，這樣的話就不沖突了。 |
2樓2011-04-12 16:49:37
liuan6126
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 6922.9
- 帖子: 330
- 在線: 88.1小時
- 蟲號: 1002451
- 注冊: 2010-04-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
3樓2011-06-02 14:51:50
4樓2012-02-14 09:38:50
liuan6126
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 6922.9
- 帖子: 330
- 在線: 88.1小時
- 蟲號: 1002451
- 注冊: 2010-04-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
西瓜(金幣+2): 不遲哈~鼓勵熱心的朋友！ 2012-02-15 22:20:18
|
實(shí)在對不起，我很久沒來了，剛看到，趕緊第一時間回復(fù)你，我不知道能不能上傳附件，文章名字是‘A system of shuttle vectors and yeast host strains designed for efficient manipulation of DNA in Saccharomyces cerevisiae’。以后遇到類似的質(zhì)粒不明確的事情，可以直接到NCBI上找這個質(zhì)粒的原始文獻(xiàn)（注意Title和Journal） LOCUS PRS304 4267 bp DNA circular SYN 14-SEP-1995 DEFINITION Yeast integrative vector pRS304 with TRP1 marker, complete sequence. ACCESSION U03436 VERSION U03436.1 GI:416305 KEYWORDS . SOURCE Cloning vector pRS304 ORGANISM Cloning vector pRS304 other sequences; artificial sequences; vectors. REFERENCE 1 (bases 1 to 4267) AUTHORS Sikorski,R.S. and Hieter,P. TITLE A system of shuttle vectors and yeast host strains designed for efficient manipulation of DNA in Saccharomyces cerevisiae JOURNAL Genetics 122 (1), 19-27 (1989) 實(shí)在抱歉，回復(fù)遲了，希望能對你用，祝進(jìn)步 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
z-w-p5樓2012-02-15 18:56:14
6樓2012-02-15 20:54:38
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
7樓2012-06-14 16:40:41
 |
8樓2015-09-28 22:04:49
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 liuan6126 的主題更新
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 機(jī)械專碩299求調(diào)劑至材料 +3 | kkcoco25 2026-03-16 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +9 | 梁梁校校 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級551，有科研經(jīng)歷 +4 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 22408 344分 求調(diào)劑 一志愿 華電計算機(jī)技術(shù) +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +5 | 申子申申 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +4 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩297已過四六級求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交通 專碩 材料355 本科雙非 求調(diào)劑 +5 | 西南交通專材355 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑 +11 | Ymlll 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 暗涌afhb 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)336分求調(diào)劑 +6 | zbzihdhd 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩274一志愿211求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 東南大學(xué)364求調(diào)劑 +5 | JasonYuiui 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070305求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-14 | 4/200 |
|