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liuan6126鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】酵母PRS整合表達(dá)質(zhì)粒使用的問題，我需要你的幫助，謝謝 已有4人參與
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我想在營養(yǎng)缺陷型酵母CEN.PK2-1C(MATa; ura3-52; trp1-289; leu2-3,112; his3Δ 1; MAL2-8C; SUC2)中整合表達(dá)幾個基因，手頭有pRS303，pRS304,pRS305，pRS306等質(zhì)粒。 我現(xiàn)在存在一個很大的疑惑，即：我能不能先用其中一個質(zhì)粒（假設(shè)為pRS303）表達(dá)一個基因，構(gòu)建一株菌，命名A吧。我是不是可以繼續(xù)使用另外三個質(zhì)粒，繼續(xù)整合表達(dá)新的基因到A中，這樣最后，我可以在一株菌內(nèi)，整合表達(dá)四個基因了。 這個問題的疑惑之處在于，我不是很確定，在后一個基因表達(dá)后，會不會破壞前面整合上去的基因呢？ 謝謝大家，這個問題對我很重要，請不吝賜教。 |
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4樓2012-02-14 09:38:50
susizheng
木蟲 (著名寫手)
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2樓2011-04-12 16:49:37
liuan6126
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3樓2011-06-02 14:51:50
liuan6126
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西瓜(金幣+2): 不遲哈~鼓勵熱心的朋友！ 2012-02-15 22:20:18
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實在對不起，我很久沒來了，剛看到，趕緊第一時間回復(fù)你，我不知道能不能上傳附件，文章名字是‘A system of shuttle vectors and yeast host strains designed for efficient manipulation of DNA in Saccharomyces cerevisiae’。以后遇到類似的質(zhì)粒不明確的事情，可以直接到NCBI上找這個質(zhì)粒的原始文獻(xiàn)（注意Title和Journal） LOCUS PRS304 4267 bp DNA circular SYN 14-SEP-1995 DEFINITION Yeast integrative vector pRS304 with TRP1 marker, complete sequence. ACCESSION U03436 VERSION U03436.1 GI:416305 KEYWORDS . SOURCE Cloning vector pRS304 ORGANISM Cloning vector pRS304 other sequences; artificial sequences; vectors. REFERENCE 1 (bases 1 to 4267) AUTHORS Sikorski,R.S. and Hieter,P. TITLE A system of shuttle vectors and yeast host strains designed for efficient manipulation of DNA in Saccharomyces cerevisiae JOURNAL Genetics 122 (1), 19-27 (1989) 實在抱歉，回復(fù)遲了，希望能對你用，祝進(jìn)步 |
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z-w-p5樓2012-02-15 18:56:14
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