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天官賜福金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化體積為什么不能超過感受態(tài)的十分之一 已有11人參與
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看各個生物試劑公司的感受態(tài)說明書上講，轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒體積不能超過感受態(tài)體積的十分之一，初不明緣由，查閱一番，有云“這樣是保證感受態(tài)細胞過量”。 既然是想讓質(zhì)粒進入感受太細胞中，為何不是讓質(zhì)粒過量呢？ 小生最近在作酵母雙雜交，對于加入的轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的體積是否一如轉(zhuǎn)化大腸桿菌那樣？望各位大蝦不吝賜教！�。� |
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5樓2011-04-11 10:31:00
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1949stone(金幣+3): 鼓勵 2011-04-11 12:13:20
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保證細胞過量時為了保證每一個質(zhì)粒都能轉(zhuǎn)進去細胞里 1.質(zhì)粒畢竟要珍貴一點，細胞好養(yǎng)又好做； 2.其實質(zhì)粒濃度高點也沒事，但是轉(zhuǎn)化效率差不多的； 3.試劑公司處于對自己的名聲負責，假如你用50ul質(zhì)粒和100ul質(zhì)粒同樣的轉(zhuǎn)化 ，都得到了100個克隆，那么你不覺得讓你用50ul質(zhì)粒做轉(zhuǎn)化更能顯示出試劑公司的試劑的NB之處嘛 4.質(zhì)粒濃度太大了，容易讓同一個細胞轉(zhuǎn)化進多個質(zhì)粒，對細胞本身是負擔，回印務(wù)高死亡率的 |
3樓2011-04-11 09:14:05
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4樓2011-04-11 10:30:39
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