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天官賜福金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化體積為什么不能超過感受態(tài)的十分之一 已有11人參與
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看各個(gè)生物試劑公司的感受態(tài)說明書上講，轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒體積不能超過感受態(tài)體積的十分之一，初不明緣由，查閱一番，有云“這樣是保證感受態(tài)細(xì)胞過量”。 既然是想讓質(zhì)粒進(jìn)入感受太細(xì)胞中，為何不是讓質(zhì)粒過量呢？ 小生最近在作酵母雙雜交，對(duì)于加入的轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的體積是否一如轉(zhuǎn)化大腸桿菌那樣？望各位大蝦不吝賜教�。�！ |
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三磷酸腺苷
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保證細(xì)胞過量時(shí)為了保證每一個(gè)質(zhì)粒都能轉(zhuǎn)進(jìn)去細(xì)胞里 1.質(zhì)粒畢竟要珍貴一點(diǎn)，細(xì)胞好養(yǎng)又好做； 2.其實(shí)質(zhì)粒濃度高點(diǎn)也沒事，但是轉(zhuǎn)化效率差不多的； 3.試劑公司處于對(duì)自己的名聲負(fù)責(zé)，假如你用50ul質(zhì)粒和100ul質(zhì)粒同樣的轉(zhuǎn)化 ，都得到了100個(gè)克隆，那么你不覺得讓你用50ul質(zhì)粒做轉(zhuǎn)化更能顯示出試劑公司的試劑的NB之處嘛 4.質(zhì)粒濃度太大了，容易讓同一個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)化進(jìn)多個(gè)質(zhì)粒，對(duì)細(xì)胞本身是負(fù)擔(dān)，回印務(wù)高死亡率的 |
3樓2011-04-11 09:14:05
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4樓2011-04-11 10:30:39
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