 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3922 | 回復(fù): 14 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 2 個(gè) BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||||
化工人2010木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳求助
|
|||
|
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的電壓、電流與跑電泳時(shí)間怎么確定啊， 恒壓 還是恒流 濃縮膠和分離膠濃度由什么決定啊 我做的是羊毛的溶解，附件是我的羊毛蛋白的電泳圖 條件：分離膠15%, 濃縮膠5%, 垂直平板電泳, 加樣量為7μL。電極緩沖液為Tris-HCl( pH 8.3)系統(tǒng)。電流40mA，濃縮膠電壓100v，分離膠電壓150v。 條帶很模糊，這是什么原因啊 。是不是羊毛的溶解 分子量較雜 還是因?yàn)榈鞍兹芤翰患兊脑蚰兀?br /> 我不想測很精確 只想知道一個(gè)大概的范圍 你看我們的譜圖 是不是只要染上色的地方 就能說是有那個(gè)范圍的蛋白嗎 就是4.1KD-66KD的蛋白都有嗎 我們現(xiàn)在又買了一個(gè)14.4KD-96KD的marker 不過還是那樣 很模糊，整個(gè)柱都有顏色 郁悶！ 哪位做過凝膠電泳的蟲友給指點(diǎn)一下 啊 不勝感激！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
2026年華南師范大學(xué)歡迎化學(xué)，化工，生物，生醫(yī)工等專業(yè)優(yōu)秀學(xué)子加入！
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
298求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
數(shù)一英一271專碩（085401）求調(diào)劑，可跨
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
295求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0856求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
材料學(xué)碩333求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
299求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿鄭州大學(xué)，080500學(xué)碩，總分317分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
289求調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 聚丙烯酰胺凝膠電泳灌膠后能放多久
已經(jīng)有17人回復(fù)
- Western Blot電泳蛋白質(zhì)外漏問題求助
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助/交流】膠原蛋白的分子量怎么測定呀？急！
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于his-tagged 蛋白純化
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】磷酸鹽緩沖液配制
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】變性聚丙烯酰胺SRAP凝膠電泳
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝膠電泳
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】western blotting
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助關(guān)于磷酸鹽緩沖液的配制
已經(jīng)有10人回復(fù)
冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
專家經(jīng)驗(yàn): +248 - BioEPI: 73
- 應(yīng)助: 257 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.272
- 金幣: 19475.9
- 散金: 1704
- 紅花: 121
- 帖子: 6591
- 在線: 2778.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 856414
- 注冊: 2009-09-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
- 管轄: 微生物
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
silicare(金幣+5, EPI+1): 2011-04-21 08:35:54
silicare(金幣+5, EPI+1): 2011-04-21 08:35:54
|
ladder跑得好，說明電泳膠、電泳液、電壓電流沒問題，給我的感覺是 1、拖帶 樣品中整個(gè)泳道都看不出明顯的單條蛋白質(zhì)帶，說明有可能樣品的制備有問題。 2、形狀 樣品中即使是拖帶，從加樣孔到后面，形狀也不是呈倒梯形，而是中間有突出，所以我猜測可能有蛋白質(zhì)樣品在內(nèi)，而且不止是一種蛋白質(zhì)。 3、上樣量 考馬斯亮藍(lán)染色還是比較敏感的，這么藍(lán)，說明可能蛋白質(zhì)很多，建議做一個(gè)上樣量梯度，可以將樣品進(jìn)行2倍為一個(gè)梯度，做幾個(gè)稀釋梯度再上樣跑，看看會(huì)不會(huì)有蛋白質(zhì)條帶。 4、樣品處理 我跑SDS-PAGE從來不煮，所以我覺得不煮也沒關(guān)系，反正已經(jīng)有SDS了，但是穩(wěn)妥起見，還是煮了算了，起碼減少一個(gè)不確定因素。 5、浪費(fèi) 一塊膠10個(gè)上樣孔，你有五個(gè)沒用上，下次設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)一些，總會(huì)有些有趣的東西可以一起跑的。 |
3樓2011-04-20 22:22:55
14樓2013-09-05 14:02:27
brightfuture01
木蟲之王 (文壇精英)
我愛打老虎
- BioEPI: 8
- 應(yīng)助: 24 (小學(xué)生)
- 貴賓: 1.2
- 金幣: 113326
- 散金: 1526
- 紅花: 224
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 28946
- 在線: 3686.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 464575
- 注冊: 2007-11-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)生物學(xué)
2樓2011-04-20 21:22:53
化工人2010
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1307.7
- 散金: 29
- 帖子: 181
- 在線: 46.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1130008
- 注冊: 2010-10-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 高分子材料結(jié)構(gòu)與性能
4樓2011-04-21 12:47:41
我要長大
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 382.8
- 帖子: 23
- 在線: 13.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 1330756
- 注冊: 2011-06-25
- 性別: MM
- 專業(yè): 生殖免疫學(xué)
5樓2011-06-26 17:07:53
hooroberts
新蟲 (小有名氣)
- BioEPI: 3
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: -17.9
- 紅花: 1
- 帖子: 52
- 在線: 10.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1331780
- 注冊: 2011-06-26
6樓2011-06-26 23:56:03
7樓2011-06-27 09:09:46
8樓2011-06-27 09:13:06
snoopyzxx
木蟲 (著名寫手)
- BioEPI: 4
- 應(yīng)助: 49 (小學(xué)生)
- 金幣: 3232.6
- 散金: 1266
- 紅花: 43
- 帖子: 2256
- 在線: 276.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 548497
- 注冊: 2008-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 全球變化生態(tài)學(xué)
9樓2011-06-27 09:14:16
化工人2010
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1307.7
- 散金: 29
- 帖子: 181
- 在線: 46.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1130008
- 注冊: 2010-10-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 高分子材料結(jié)構(gòu)與性能
10樓2011-06-27 09:25:45
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 化工人2010 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085701求調(diào)劑初試286分 +4 | secret0328 2026-03-28 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分求調(diào)劑 +9 | 大饞小子 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +3 | 山頂見α 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 346求調(diào)劑 一志愿070303有機(jī)化學(xué) +3 | 蘿卜燉青菜 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703本科鄭州大學(xué)求調(diào)劑 +3 | nhj_ 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081200-314 +3 | LILIQQ 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085404求調(diào)劑，總分309，本科經(jīng)歷較為豐富 +4 | 來財(cái)aa 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 小木蟲085600 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑 +4 | 愛吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +9 | vv迷 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +5 | 求求讓我有書讀?/a> 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +5 | 哇盧卡庫 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑推薦 +5 | 清酒714 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑323材料與化工 +7 | 1124361 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +11 | junqihahaha 2026-03-26 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | wasdssaa 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院-光纖傳感課題組招生-中國科學(xué)院大學(xué)、深圳理工大學(xué)聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +6 | 藍(lán)山月 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0854人工智能方向招收調(diào)劑 +4 | 章小魚567 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境學(xué)碩288求調(diào)劑 +8 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 8/400 |
|