 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3930 | 回復(fù): 14 | |||||
| 本帖產(chǎn)生 2 個(gè) BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||||
化工人2010木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳求助
|
||||
|
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的電壓、電流與跑電泳時(shí)間怎么確定啊， 恒壓 還是恒流 濃縮膠和分離膠濃度由什么決定啊 我做的是羊毛的溶解，附件是我的羊毛蛋白的電泳圖 條件：分離膠15%, 濃縮膠5%, 垂直平板電泳, 加樣量為7μL。電極緩沖液為Tris-HCl( pH 8.3)系統(tǒng)。電流40mA，濃縮膠電壓100v，分離膠電壓150v。 條帶很模糊，這是什么原因啊 。是不是羊毛的溶解 分子量較雜 還是因?yàn)榈鞍兹芤翰患兊脑蚰兀?br /> 我不想測很精確 只想知道一個(gè)大概的范圍 你看我們的譜圖 是不是只要染上色的地方 就能說是有那個(gè)范圍的蛋白嗎 就是4.1KD-66KD的蛋白都有嗎 我們現(xiàn)在又買了一個(gè)14.4KD-96KD的marker 不過還是那樣 很模糊，整個(gè)柱都有顏色 郁悶！ 哪位做過凝膠電泳的蟲友給指點(diǎn)一下 啊 不勝感激！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
環(huán)境工程 085701，267求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
275求調(diào)劑
已經(jīng)有17人回復(fù)
-
334分 一志愿武理 材料求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿北京化工大學(xué)材料與化工（085600）296求調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
085600 286分 材料求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
材料與化工272求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
南京大學(xué)化學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
085601材料工程找調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
考研調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
085600 材料與化工 329分求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 聚丙烯酰胺凝膠電泳灌膠后能放多久
已經(jīng)有17人回復(fù)
- Western Blot電泳蛋白質(zhì)外漏問題求助
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助/交流】膠原蛋白的分子量怎么測定呀？急！
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于his-tagged 蛋白純化
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】磷酸鹽緩沖液配制
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】變性聚丙烯酰胺SRAP凝膠電泳
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】聚丙烯酰胺凝膠電泳
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】western blotting
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助關(guān)于磷酸鹽緩沖液的配制
已經(jīng)有10人回復(fù)
冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
專家經(jīng)驗(yàn): +248 - BioEPI: 73
- 應(yīng)助: 257 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.272
- 金幣: 19477.9
- 散金: 1704
- 紅花: 121
- 帖子: 6591
- 在線: 2778.8小時(shí)
- 蟲號: 856414
- 注冊: 2009-09-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
- 管轄: 微生物
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
silicare(金幣+5, EPI+1): 2011-04-21 08:35:54
silicare(金幣+5, EPI+1): 2011-04-21 08:35:54
|
ladder跑得好，說明電泳膠、電泳液、電壓電流沒問題，給我的感覺是 1、拖帶 樣品中整個(gè)泳道都看不出明顯的單條蛋白質(zhì)帶，說明有可能樣品的制備有問題。 2、形狀 樣品中即使是拖帶，從加樣孔到后面，形狀也不是呈倒梯形，而是中間有突出，所以我猜測可能有蛋白質(zhì)樣品在內(nèi)，而且不止是一種蛋白質(zhì)。 3、上樣量 考馬斯亮藍(lán)染色還是比較敏感的，這么藍(lán)，說明可能蛋白質(zhì)很多，建議做一個(gè)上樣量梯度，可以將樣品進(jìn)行2倍為一個(gè)梯度，做幾個(gè)稀釋梯度再上樣跑，看看會(huì)不會(huì)有蛋白質(zhì)條帶。 4、樣品處理 我跑SDS-PAGE從來不煮，所以我覺得不煮也沒關(guān)系，反正已經(jīng)有SDS了，但是穩(wěn)妥起見，還是煮了算了，起碼減少一個(gè)不確定因素。 5、浪費(fèi) 一塊膠10個(gè)上樣孔，你有五個(gè)沒用上，下次設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)一些，總會(huì)有些有趣的東西可以一起跑的。 |
3樓2011-04-20 22:22:55
brightfuture01
木蟲之王 (文壇精英)
我愛打老虎
- BioEPI: 8
- 應(yīng)助: 24 (小學(xué)生)
- 貴賓: 1.2
- 金幣: 113326
- 散金: 1526
- 紅花: 224
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 28946
- 在線: 3686.9小時(shí)
- 蟲號: 464575
- 注冊: 2007-11-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)生物學(xué)
2樓2011-04-20 21:22:53
化工人2010
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1307.7
- 散金: 29
- 帖子: 181
- 在線: 46.8小時(shí)
- 蟲號: 1130008
- 注冊: 2010-10-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 高分子材料結(jié)構(gòu)與性能
4樓2011-04-21 12:47:41
我要長大
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 382.8
- 帖子: 23
- 在線: 13.6小時(shí)
- 蟲號: 1330756
- 注冊: 2011-06-25
- 性別: MM
- 專業(yè): 生殖免疫學(xué)
5樓2011-06-26 17:07:53
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學(xué)工程085602 305分求調(diào)劑 +18 | RichLi_ 2026-03-25 | 18/900 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿雙一流機(jī)械285分求調(diào)劑 +4 | 幸運(yùn)的三木 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +6 | Amber00 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +8 | 蕉蕉123 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +5 | 冬十三 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 食品工程專碩一志愿中海洋309求調(diào)劑 +4 | 小張zxy張 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分求調(diào)劑 +9 | 大饞小子 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +7 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703一志愿9，初試成績：338，四六級已過，有科研經(jīng)歷，求調(diào)劑！ +4 | Zuhui0306 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +8 | 邱gl 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 07化學(xué)280分求調(diào)劑 +10 | 722865 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +10 | land xuxu 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 08開頭275求調(diào)劑 +4 | 拉誰不重要 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +5 | 哇盧卡庫 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 294分080500材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +4 | 柳溪邊 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +6 | 藍(lán)山月 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 網(wǎng)絡(luò)空間安全0839招調(diào)劑 +4 | w320357296 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 324 +4 | Promise-jyl 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | ALULU4408 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 接收2026碩士調(diào)劑(學(xué)碩+專碩) +4 | allen-yin 2026-03-23 | 6/300 |
|