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gaoqian8717金蟲 (小有名氣)
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[求助]
霉菌在發(fā)酵罐中轉(zhuǎn)速能不能提高？
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大家好！我是剛從做搖瓶轉(zhuǎn)向上罐的，遇到問題了想請(qǐng)教下大家： 最近做土曲霉上罐（7Ｌ玻璃罐）發(fā)酵生產(chǎn)有機(jī)酸時(shí)，80%對(duì)應(yīng)文獻(xiàn)轉(zhuǎn)速設(shè)置的是100-150rpm，只有很少幾篇文獻(xiàn)出現(xiàn)300-400rpm的，最高的400rpm。 按照大部分文獻(xiàn)的做法，我設(shè)置轉(zhuǎn)速125rpm，通氣量我開到最大（近4vvm，別人基本都才0.2-0.5VVm），70h以前ＤＯ都只能顯示為0～5，可能是溶氧不足導(dǎo)致我的目標(biāo)產(chǎn)物就產(chǎn)量不足搖瓶１／６。 后來我逐漸升高轉(zhuǎn)速，發(fā)現(xiàn)調(diào)到550rpm，通氣量開到最大，才能使溶氧DO是高于30～45。 但是文獻(xiàn)說霉菌轉(zhuǎn)速太高，機(jī)械剪切力太大，對(duì)霉菌形態(tài)有影響。 所以我想問問大家（1）有人做霉菌遇到過跟文獻(xiàn)這么不相符合的情況嗎（90%都是外文文獻(xiàn)，有篇文獻(xiàn)是150rpm，0.5vvm，泡沫太多無法控制，中途停止）？ （2）是不是轉(zhuǎn)速不應(yīng)該向我這樣開這么高，對(duì)菌的損害很大？我是70h后開大的，產(chǎn)率是明顯提高了，我擔(dān)心的是0h就開始轉(zhuǎn)速這么高的話，是不是很快菌就受不了，死掉了  。。。謝謝大家了！ |
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2樓2011-04-29 07:43:47
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3樓2011-04-29 08:27:22
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5樓2011-04-29 10:46:00
flightty
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rainwander(EPI+1): 2011-04-29 11:00:29
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rainwander(金幣+3): 鼓勵(lì)交流 2011-04-29 11:01:00
| 樓主的發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速不能和DO偶聯(lián)么？按道理說7L的發(fā)酵罐三四百轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速算比較正常了，雖然真菌的菌絲和發(fā)酵液表觀粘度與攪拌關(guān)系很大，但攪拌的多少與發(fā)酵罐的大小也有關(guān)系。比如7L罐的攪拌500左右的話，50L罐估計(jì)400就可以，500L估計(jì)250轉(zhuǎn)，5t的150就可以。所以樓主或許應(yīng)該看看文獻(xiàn)所用發(fā)酵罐的規(guī)模，還有就是也別太相信文獻(xiàn)。雖然真菌的菌絲粗而常，且菌絲形態(tài)受攪拌影響很大，但也不用過于擔(dān)心攪拌剪切會(huì)把的菌絲弄死，頂多也就是影響形態(tài)而已。 |
6樓2011-04-29 10:56:59
wgy2007
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【答案】應(yīng)助回帖
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wolfebst(金幣+3): 謝謝你的回答 2011-04-29 14:12:19
wolfebst(EPI+1): 鼓勵(lì)交流 2011-05-03 12:47:33
wolfebst(金幣+3): 謝謝你的回答 2011-04-29 14:12:19
wolfebst(EPI+1): 鼓勵(lì)交流 2011-05-03 12:47:33
| 不知道你做的土曲霉發(fā)酵控制的DO是多少，我做過毛霉的發(fā)酵，是生產(chǎn)酶的，要求DO≥40％，轉(zhuǎn)速、風(fēng)量、罐壓都是影響DO的關(guān)鍵因素，在長(zhǎng)菌期轉(zhuǎn)速不能太高，一般控制在400rpm以下，起始通風(fēng)比為1：0.3左右，罐壓在0.05～0.08Mpa，校正DO值為100％，當(dāng)孢子萌發(fā)長(zhǎng)出大量的菌絲后，耗氧量增大，DO下降低于40％時(shí)可以通過提高轉(zhuǎn)速、風(fēng)量使DO≥40％，最高轉(zhuǎn)速可以達(dá)到700～800rpm，在提高轉(zhuǎn)速后過幾小時(shí)要取樣鏡檢，觀察菌絲是否有斷裂的，如果有量比較多時(shí)要降低轉(zhuǎn)速。當(dāng)轉(zhuǎn)速、風(fēng)量都提到最大量，如果DO還是低于40％，可以適當(dāng)提高罐壓到0.1～0.12Mpa，但不知你的發(fā)酵罐承壓情況怎么樣。另外發(fā)酵液的粘度也會(huì)影響DO，如果發(fā)酵中后期所有的條件都達(dá)到極限了可以考慮補(bǔ)一些無菌水，降低發(fā)酵液的粘度也會(huì)增加發(fā)酵液的DO。還是要靠自己摸索。 |
7樓2011-04-29 11:09:45
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8樓2011-05-01 17:33:34
9樓2011-05-03 12:20:06
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首先很感謝你耐心盡心的回復(fù)我的帖子。 我的情況還沒完全描述清楚：（1）我的發(fā)酵罐是美國(guó)產(chǎn)的7L玻璃罐，沒有罐壓這個(gè)參數(shù)。 （2）我的DO是變動(dòng)的，文獻(xiàn)上也沒有說要控制多少，剛接入幾個(gè)小時(shí)內(nèi)DO可以到達(dá)90以上，后來慢慢降低，接入12h左右DO降低至10左右，但是就產(chǎn)酸情況來看，10左右產(chǎn)酸不算慢，12h時(shí)轉(zhuǎn)速升至470rpm，通氣量升至2vvm，這樣大致是DO維持在10左右。但通氣量和轉(zhuǎn)速的升高導(dǎo)致大量起泡（培養(yǎng)基含工業(yè)上殘余的玉米漿），手動(dòng)加入幾滴硅油。這時(shí)問題又來了，加入2-3滴硅油后，泡立馬沒有，DO也立馬降低至5左右；這樣維持時(shí)間不到半個(gè)小時(shí)就又要加入消泡劑，如此循環(huán)，DO剛升上去（不到10）就隨消泡劑的加入又降下來。1-2天后消泡劑積累總量過大，轉(zhuǎn)速提升至500rpm，通氣量近4vvm，DO最大也就到5，很難再生上去。 （3）通氣量增大，轉(zhuǎn)速高后水分揮發(fā)厲害，12h揮發(fā)約500ml，我的裝液量是4L，后來就是像你說的那樣，往發(fā)酵罐中流加無菌水維持體積在3.5L左右。 再次謝謝你！打擾了。 |
10樓2011-05-03 18:47:04
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