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lct515新蟲 (著名寫手)
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[求助]
pnpp法測定脂肪酶問題
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我用的p-NPP(對硝基苯棕櫚酸酯)法測脂肪酶活性,1mmol/L p-NPP的配置方法是:先0.0378g p-NPP再加入1mL曲拉通-100與5mL異丙醇再用Tris-HCl(pH8.0)定容至100mL。 測定酶的活性時:取1.5mL 1mmol/L的p-NPP與1.5mLTris-HCl(pH8.0)再加入0.5mL粗酶液10min后再加入8.2mL蒸餾水,對照以0.5mL 90度酶活的粗酶液其他條件相同。紫外410nm處測吸光度。 但我現(xiàn)在出現(xiàn)問題是:1 滅活的酶液的吸光度比沒有滅活的要高 2 配置p-NPP溶液時p-Npp并不完全溶解 3 即使待測酶是標準的脂肪酶10min后也不會發(fā)現(xiàn)明顯的顏色變化。 請問是什么原因,謝謝!! |
生工檢測理論與實務 |
新蟲 (初入文壇)

新蟲 (著名寫手)

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