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◆細胞菜鳥問個養(yǎng)細胞的基礎(chǔ)問題◆
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正在自己拿著說明書養(yǎng)PC12細胞 1.細胞在培養(yǎng)皿中所占的面積約70% 2.加臺盼藍計數(shù)后，進行傳代，要求細胞的推薦播種濃度為1.5×10的5次方/ml 說道細胞的個數(shù)，怎么會用體積單位，怎么算的。然后在培養(yǎng)皿中所占面積又是怎么計算的？ 菜鳥求大俠幫組啊，給金幣! [ Last edited by cddryw on 2011-5-26 at 18:01 ] |
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2樓2011-05-27 15:20:36
credo
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3樓2011-05-27 16:07:39
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【答案】應(yīng)助回帖
cddryw(金幣+10): 非常詳細，就喜歡這樣的回答，謝謝. 2011-05-30 21:39:16
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其實說明書說的和實際中操作還是有很大的差別的，當然按照說明書操作最好~~~ 樓上說的其實也很明白了，對于初學者，我在具體說一下： ①細胞占培養(yǎng)皿（其實最好用培養(yǎng)瓶，污染的幾率相對小一些）面積的70%就是細胞生長到對數(shù)生長期時期的狀態(tài)，當然一般都是目測，80%也沒有關(guān)系，但是最好不要等到細胞長滿整個底部再去消化傳代，那時候就有些晚了~~~ ②細胞計數(shù)：最簡單的就是用細胞計數(shù)板，至于加臺盼藍染色，我們平時操作都沒有，還有就是傳代的時候根本不計數(shù)，但是還介紹一下細胞計數(shù)的方法，以后在做相關(guān)細胞試驗需要細胞計數(shù)的時候也可用得上：首先消化離心后，棄去離心管內(nèi)的培養(yǎng)基，加入定量的培養(yǎng)基，吹散細胞，然后取一滴滴于細胞計數(shù)板一側(cè)的邊緣邊緣處，然后在顯微鏡下觀察透過蓋玻片下的那四個象限的細胞數(shù)，取均數(shù)，用以下公式算得每mL的細胞懸液里面細胞的個數(shù)：均數(shù)×10（4次方），即為每mL里面細胞所含個數(shù)。 如果之前沒有養(yǎng)過細胞，最重要的就是如何防止污染，還有就是邊凍存，邊做實驗。 祝好運~~~  |
4樓2011-05-30 20:37:20
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5樓2011-05-30 20:41:19
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