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fancrystalli新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
土壤中含有農(nóng)藥，提取的土壤DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，農(nóng)藥會(huì)抑制PCR反應(yīng)嗎
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| 最近在做土壤微生態(tài)研究，目的是研究土壤中添加農(nóng)藥后對(duì)土壤中微生物的影響，取樣在農(nóng)藥施用一個(gè)月內(nèi)，具體殘留還未做�，F(xiàn)在用的是MOBIO公司的power DNA提取試劑盒，按照大多數(shù)人的說(shuō)法，這已經(jīng)是很好的而且用的很廣的土壤DNA提取試劑盒了，提取出來(lái)的DNA電泳可見(jiàn)，但就是PCR得不到目的條帶，陽(yáng)性對(duì)照成功擴(kuò)增出，采用降落PCR，將樣品進(jìn)行過(guò)10~50倍的稀釋?zhuān)詳U(kuò)增失敗。想請(qǐng)教有經(jīng)驗(yàn)的前輩，會(huì)不會(huì)是因?yàn)橥寥乐械霓r(nóng)藥殘留對(duì)PCR產(chǎn)生了抑制，如果是的話，應(yīng)該怎樣處理？在此，先謝謝大家了。 |
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cdl007
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2樓2011-06-15 19:55:00
gwbk
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+5, EPI+1): good！ 2011-06-15 21:50:56
西瓜(金幣+5, EPI+1): good！ 2011-06-15 21:50:56
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農(nóng)藥一般不會(huì)抑制DNA聚合酶活性，而抑制膽堿酯酶活性的較多，農(nóng)藥大多是神經(jīng)毒劑，一般導(dǎo)致昆蟲(chóng)過(guò)度興奮而死，反過(guò)來(lái)說(shuō)，幾乎沒(méi)有農(nóng)藥設(shè)計(jì)DNA聚合酶為靶點(diǎn)。而除草劑一般分為激素類(lèi)、光合抑制類(lèi)、阻抑氨基酸、脂類(lèi)合成、抑制細(xì)胞分裂等，也不會(huì)抑制DNA聚合酶。 再說(shuō)，你用的試劑盒我也在用，相當(dāng)好。提純的DNA不會(huì)帶有土壤中DNA以外的物質(zhì)，水除外。 |
3樓2011-06-15 20:41:02
fancrystalli
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