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fancrystalli新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
土壤中含有農(nóng)藥,提取的土壤DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,農(nóng)藥會(huì)抑制PCR反應(yīng)嗎
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| 最近在做土壤微生態(tài)研究,目的是研究土壤中添加農(nóng)藥后對(duì)土壤中微生物的影響,取樣在農(nóng)藥施用一個(gè)月內(nèi),具體殘留還未做。現(xiàn)在用的是MOBIO公司的power DNA提取試劑盒,按照大多數(shù)人的說(shuō)法,這已經(jīng)是很好的而且用的很廣的土壤DNA提取試劑盒了,提取出來(lái)的DNA電泳可見(jiàn),但就是PCR得不到目的條帶,陽(yáng)性對(duì)照成功擴(kuò)增出,采用降落PCR,將樣品進(jìn)行過(guò)10~50倍的稀釋,仍擴(kuò)增失敗。想請(qǐng)教有經(jīng)驗(yàn)的前輩,會(huì)不會(huì)是因?yàn)橥寥乐械霓r(nóng)藥殘留對(duì)PCR產(chǎn)生了抑制,如果是的話,應(yīng)該怎樣處理?在此,先謝謝大家了。 |
【分子生物】EPI帖 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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農(nóng)藥一般不會(huì)抑制DNA聚合酶活性,而抑制膽堿酯酶活性的較多,農(nóng)藥大多是神經(jīng)毒劑,一般導(dǎo)致昆蟲(chóng)過(guò)度興奮而死,反過(guò)來(lái)說(shuō),幾乎沒(méi)有農(nóng)藥設(shè)計(jì)DNA聚合酶為靶點(diǎn)。而除草劑一般分為激素類、光合抑制類、阻抑氨基酸、脂類合成、抑制細(xì)胞分裂等,也不會(huì)抑制DNA聚合酶。 再說(shuō),你用的試劑盒我也在用,相當(dāng)好。提純的DNA不會(huì)帶有土壤中DNA以外的物質(zhì),水除外。 |
金蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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