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2006tuyi金蟲 (小有名氣)
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[交流]
電轉(zhuǎn)化以及抽質(zhì)粒問題 已有3人參與
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| 將穿梭質(zhì)粒pMG36E（紅霉素抗性）電轉(zhuǎn)到乳酸片球菌里面（野生型的），涂板后長(zhǎng)出單菌落，然后同時(shí)將一個(gè)單菌落接種到液體培養(yǎng)基以及接種到另一塊新鮮的帶有抗生素的的平板上，液體培養(yǎng)菌體長(zhǎng)好后抽質(zhì)粒抽得出來，證明轉(zhuǎn)進(jìn)去了�？墒菑霓D(zhuǎn)涂的平板上挑菌落養(yǎng)菌抽質(zhì)粒卻怎么也抽不出來，這是為什么�。� |
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天使托
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T.Shen
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2樓2011-06-28 16:30:39
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| 我重復(fù)好多次了，都是抽不出來，而且覺得抽質(zhì)粒方法應(yīng)該沒什么問題。我做過3次電轉(zhuǎn)，第一次直接從電轉(zhuǎn)后涂的板上挑菌（挑了5個(gè)），長(zhǎng)好后抽質(zhì)粒（分三次抽的），都能抽出來。補(bǔ)充一下，我是用革蘭氏陰性菌的質(zhì)粒小抽試劑盒配合溶菌酶進(jìn)行抽的，加入溶液1的同時(shí)添加15mg/mL的溶菌酶，37度30分鐘，然后再按照說明書一步步來做的。而且我上面講的涂板和接種到液體培養(yǎng)基挑的是同一個(gè)菌落（用接種針挑一半劃線用牙簽將另外一半挑到液體培養(yǎng)基中）。 |
3樓2011-06-28 20:28:42
4樓2015-07-31 16:08:11
810763156
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5樓2017-11-30 23:26:24
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