 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1293 | 回復(fù): 5 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||||
bdchengli木蟲(chóng) (小有名氣)
|
[求助]
切口酶用量問(wèn)題
|
|||
| 我的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是在發(fā)卡結(jié)構(gòu)的分子信標(biāo)上設(shè)計(jì)了兩個(gè)酶切位點(diǎn)，為什么我的切口酶用量要非常大才能出現(xiàn)象，是以前用量的4倍甚至更多 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專(zhuān)輯推薦
 Aptamer_Biosensor | 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有114人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 關(guān)于化學(xué)氧化法制備聚吡咯時(shí)氧化劑FeCl3用量的問(wèn)題
已經(jīng)有20人回復(fù)
- DNA的連接反應(yīng)
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【交流】PTFE做粘結(jié)劑的用量問(wèn)題
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助】溶劑用量 反應(yīng)時(shí)間 相關(guān)問(wèn)題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于注射液中活性炭的用量問(wèn)題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助】硅烷封端劑的用量問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【討論】DMAP的用量問(wèn)題
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 【求助】EDC DMAP 用量問(wèn)題，及反應(yīng)時(shí)間
已經(jīng)有10人回復(fù)
空谷幽風(fēng)
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 32
- 應(yīng)助: 13 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.05
- 金幣: 1106.1
- 散金: 500
- 紅花: 13
- 帖子: 615
- 在線: 116.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 714271
- 注冊(cè): 2009-03-04
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+5, EPI+1): 個(gè)別酶的活力定義不一樣，樓主還需看說(shuō)明書(shū)。 2011-07-22 12:03:36
bdchengli(金幣+5): 2011-07-22 15:55:31
西瓜(金幣+5, EPI+1): 個(gè)別酶的活力定義不一樣，樓主還需看說(shuō)明書(shū)。 2011-07-22 12:03:36
bdchengli(金幣+5): 2011-07-22 15:55:31
|
內(nèi)切酶的一般用量是1ul酶切大約1ugDNA，當(dāng)然有些時(shí)候需要加大酶的用量： （1）如果DNA內(nèi)含有多個(gè)你所要酶切的酶切位點(diǎn)，那么你需要加大用量（道理很簡(jiǎn)單，不用解釋?zhuān)?br /> （2）雙酶切時(shí)一種酶在公用buffer里面活性在80%一下 （3）經(jīng)以前驗(yàn)證，這種酶較其他酶活性低的，一般不常用的酶（稀缺一點(diǎn)的）會(huì)出現(xiàn)這種情況 |
2樓2011-07-22 10:43:13
bdchengli
木蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 2701.4
- 紅花: 1
- 帖子: 93
- 在線: 32.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1213549
- 注冊(cè): 2011-02-25
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生化分析及生物傳感
3樓2011-07-22 10:50:40
zlu520
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
限制人
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 20367.5
- 散金: 1372
- 紅花: 8
- 帖子: 4166
- 在線: 1947.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 877577
- 注冊(cè): 2009-10-19
- 專(zhuān)業(yè): 數(shù)論
4樓2011-07-22 11:03:56
空谷幽風(fēng)
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 32
- 應(yīng)助: 13 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.05
- 金幣: 1106.1
- 散金: 500
- 紅花: 13
- 帖子: 615
- 在線: 116.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 714271
- 注冊(cè): 2009-03-04
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+4): Good！ 2011-07-22 16:53:25
西瓜(金幣+4): Good！ 2011-07-22 16:53:25
| 影響酶切活性的因素有許多，概略的說(shuō)可分為外因和內(nèi)因。外因是可預(yù)見(jiàn)和控制的，如反應(yīng)條件、底物的純度（是否有雜質(zhì)、是否有鹽酚的污染）、何時(shí)加酶、操作是否恰當(dāng)、反應(yīng)體積的選擇以及反應(yīng)時(shí)間的長(zhǎng)短等等。內(nèi)因包括位點(diǎn)偏愛(ài)性、甲基化底物、底物的構(gòu)象。構(gòu)象的影響主要指切割線性 DNA 和超螺旋 DNA 時(shí)的活性，如與切割 lDNA 相比， EcoRⅠ、PstⅠ、SalⅠ 需要至少 2.5-10 倍的酶來(lái)切割 pBR322 的超螺旋 DNA 。 PaeRTⅠ 與 XhoⅠ 切割相同的序列（C↓TCGAG），但如果 5' 端為 CT 則 PaeRTⅠ 不能切割。 |
5樓2011-07-22 12:38:35
bdchengli
木蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 2701.4
- 紅花: 1
- 帖子: 93
- 在線: 32.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1213549
- 注冊(cè): 2011-02-25
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生化分析及生物傳感
6樓2011-07-22 15:54:23
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 bdchengli 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 081700 調(diào)劑 267分 +7 | 迷人的哈哈 2026-03-23 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +3 | 匹克i 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +4 | 我想讀研11 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +10 | 梁梁校校 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 336化工調(diào)劑 +4 | 王大坦1 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300，一志愿北航320求調(diào)劑 +3 | Jerry0216 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 冬十三 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)071000 329分求調(diào)劑 +5 | 我愛(ài)生物生物愛(ài)?/a> 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 319求調(diào)劑 +4 | 小力氣珂珂 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 260求調(diào)劑 +3 | 朱芷琳 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 初試 317 +7 | 半拉月丙 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0805 316求調(diào)劑 +3 | 大雪深藏 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +4 | 肆叁貳壹22 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | Mqqqqqq 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 初始318分求調(diào)劑（有工作經(jīng)驗(yàn)） +3 | 1911236844 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 華東師范大學(xué)-071000生物學(xué)-293分-求調(diào)劑 +3 | 研究生何瑤明 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +6 | www_q 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿南理工085701環(huán)境302求調(diào)劑院校 +3 | 葵梓衛(wèi)隊(duì) 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +5 | pupcoco 2026-03-17 | 8/400 |
|