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war3one金蟲 (著名寫手)
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[求助]
求助大家怎么用HPLC測發(fā)酵液乙醇含量
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| 實(shí)驗(yàn)室沒有氣相，只有液相，C18色譜柱，求助大家怎么測發(fā)酵液乙醇含量，先謝謝各位了！ |
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jinbo7
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
war3one(金幣+5): 謝謝了 2011-08-09 10:40:54
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估計是不是視差折光檢測器也是沒有的吧？ 沒條件就采用滴定法測定乙醇吧，原理：首先是利用重鉻酸鉀氧化乙醇成為醋酸。3CH3CH2OH+2K2CrCO7+8H2SO4 →3CH3COOH+2Cr2(SO4)3+2K2SO4+11H2O ，氧化乙醇后剩余的重鉻酸鉀則與碘化鉀作用， 生成游離的碘。 K2Cr2O7+6KI+7H2SO4 →4K2SO4+Cr2(SO4)3+7H2O+3I2 最后游離的碘再被硫代硫酸鈉還原，2Na2S2O3+I2→ 2NaI+Na2S4O6 從而根據(jù)氧化乙醇所消耗的重鉻酸鉀量計算出乙醇含量。 參考檢測方法： 試 劑 制 備 ： （1 ） 0. 1 N 標(biāo)準(zhǔn)重鉻酸鉀溶液： 精確稱取重鉻酸鉀 4. 9g， 溶解后移入 1 000ml 容量瓶中， 稀釋到刻度。 （2） 0. 1 N 硫代硫酸鈉溶液： 稱取硫代硫酸鈉約 25 ， 溶解后移入1 000ml 容量瓶中， 稀釋后定容至刻度。 （3） 硫代硫酸鈉溶液的標(biāo)定： 吸取標(biāo)準(zhǔn)重鉻酸鉀溶液20ml 于500ml 的三角瓶中， 用量筒加入濃硫酸5ml 及碘化鉀 2g， 蓋塞在暗處 放置 5min， 加水約 200ml， 用待標(biāo)定的硫代硫酸鈉溶液滴定， 當(dāng)溶液由橙色為 止 。 從 硫 代 硫 酸 鈉 的 用 量 計 算 出 濃 度 。 2 、 樣 品 的 測 定 （1 ） 微量乙醇的提�。� 稱取樣品適量，置燒瓶中， 連接冷凝器在瓶底加熱蒸餾，收集蒸餾液于100ml 容量瓶中，達(dá)到刻度為止， 蓋上瓶塞，混合均勻。 （2） 乙醇的氧化： 在200ml的三角瓶中放入0. 1 N 的重鉻酸鉀20ml， 用量筒取濃硫酸5ml， 緩緩地倒入， 然后滴入蒸餾液10ml， 并不斷振蕩， 連接冷凝管， 放在石棉網(wǎng)上加熱回流， 使瓶中溶液輕微煮沸 10min。 （3） 游離碘的生成： 待回流過的溶液冷卻后， 用水沖冷凝管， 使全部溶液無損地盛在200ml三角瓶中，然后小心地將溶液移入500ml三角瓶， 用水約 200ml 沖洗200ml 的三角瓶， 同時加入碘化鉀1g , 蓋塞，放置暗處5min 。 （4）滴定：自滴定管中滴入0.1N的硫代硫酸鈉溶液，當(dāng)溶液的顏色由橙色變成淺黃色時， 加淀粉溶液 5ml，繼續(xù)滴定溶液由蘭色變?yōu)榫G色為止，記下消耗的硫化硫酸鈉溶液的毫升數(shù)。0.0115—消耗1毫克當(dāng)量的重鉻酸鉀所能氧化的乙醇克數(shù) |
5樓2011-08-02 10:41:15
2樓2011-08-01 09:39:06
war3one
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3樓2011-08-02 09:46:16
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4樓2011-08-02 10:14:15
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