造血干細(xì)胞

銅蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 89.1
帖子: 49
在線: 9.4小時
蟲號: 1325909

[交流] 一個關(guān)于感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率的問題

無論是電轉(zhuǎn)還是化學(xué)轉(zhuǎn)化，多少的轉(zhuǎn)化率才是達(dá)到了理想值，既是涂板培養(yǎng)12小時后菌落數(shù)量達(dá)到多少？我之前做得都是化學(xué)法培養(yǎng)2天也就出那么3幾個，最近做了超級感受態(tài)，也用了電轉(zhuǎn)，12小時之后就能長出來8個了，老師還嫌感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率低，求解�！斗肿涌寺　飞险f電轉(zhuǎn)的效率有10的7次方~10的8次方,那么這個7次方8次方是怎么得到的？在平板上是個怎么樣的表現(xiàn)？

回復(fù)此樓

» 收錄本帖的淘帖專輯推薦

分子生化實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)積累

蛋白表達(dá)純化與檢測

» 猜你喜歡

不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千” 已經(jīng)有0人回復(fù)
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)? 已經(jīng)有79人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI” 已經(jīng)有0人回復(fù)
納米粒度分析已經(jīng)有3人回復(fù)
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京已經(jīng)有0人回復(fù)
留學(xué)--博士招生已經(jīng)有16人回復(fù)
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限已經(jīng)有4人回復(fù)
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑已經(jīng)有0人回復(fù)
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦已經(jīng)有1人回復(fù)

» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)

» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:

虛心請教關(guān)于平—粘末端的連接問題已經(jīng)有18人回復(fù)
關(guān)于畢赤酵母電轉(zhuǎn)化已經(jīng)有10人回復(fù)
求助關(guān)于轉(zhuǎn)化的問題？已經(jīng)有22人回復(fù)
【求助/交流】轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌復(fù)蘇的轉(zhuǎn)速有影響嗎? 已經(jīng)有6人回復(fù)
【求助/交流】質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化體積為什么不能超過感受態(tài)的十分之一已經(jīng)有16人回復(fù)
【求助/交流】大腸桿菌感受態(tài)制備及轉(zhuǎn)化中的問題已經(jīng)有3人回復(fù)
【求助/交流】請教關(guān)于大腸桿菌lamda RED重組問題已經(jīng)有23人回復(fù)

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼

1樓 2011-09-05 14:07:09

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

回帖支持 ( 顯示支持度最高的前 50 名 )

linqin1029

新蟲 (初入文壇)

MolEPI: 1
應(yīng)助: 3 (幼兒園)
金幣: 156.7
帖子: 30
在線: 26.7小時
蟲號: 1095143

★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

如果你要確定感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率，可將一定量的完整質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到感受態(tài)細(xì)胞中，取一部分轉(zhuǎn)化的細(xì)菌，涂布到選擇培養(yǎng)基上，可用菌落生長單位/μg DNA，按下面的方法計算感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。計算公式：轉(zhuǎn)化效率＝產(chǎn)生菌落的總數(shù)/鋪板DNA的總量。

例如，取1μl（0.1ng/μl）完整的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化100μl的感受態(tài)細(xì)胞。向轉(zhuǎn)化反應(yīng)液中加入900μl培養(yǎng)液，讓細(xì)菌恢復(fù)一小段時間，取100μl鋪板.培養(yǎng)過夜，產(chǎn)生1000個菌落。轉(zhuǎn)化0.1ng DNA，用SOC稀釋到1000μl后，取1/10涂平板，則涂平板共用0.01ng DNA 質(zhì)粒，所以轉(zhuǎn)化率＝1000克隆/0.01ng DNA =105cfu/ng=10的8次方cfu/μg。

一般轉(zhuǎn)化效率1×10的6次方cfu/μg DNA可滿足普通的亞克隆實(shí)驗(yàn)；1×10的7次方cfu/μg DNA用于作更復(fù)雜的亞克隆，有限量的DNA的轉(zhuǎn)化，T-克隆實(shí)驗(yàn)；構(gòu)建文庫和突變要求用的轉(zhuǎn)化的效率為>1×10的8次方cfu/μg DNA。

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）

冰風(fēng)顫木

11樓2011-09-09 10:14:13

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

普通回帖

天使托

專家顧問 (職業(yè)作家)

★ ★ ★
造血干細(xì)胞(金幣+1):謝謝參與
dhd997(金幣+2): 有時候還不是想穩(wěn)點(diǎn) 2011-09-06 07:37:24

有時候長太多并不是一件好事情。。。。十幾個，幾個就OK了。。。
哪怕只有一個，只要對就OK�。。�

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

2樓2011-09-05 15:50:43

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

linlingdaiyu

銅蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 125.8
帖子: 11
在線: 3.5小時
蟲號: 1389745

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
dhd997(金幣+5): 鼓勵新蟲交流 2011-09-06 07:37:42

我的感受態(tài)效率都挺高的啊

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

3樓2011-09-05 21:38:21

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

475502411

銅蟲 (著名寫手)

★ ★ ★
dhd997(金幣+3): good 2011-09-06 07:37:52

是啊，只要有菌落就好，沒必要那么多，我做的轉(zhuǎn)化效率挺高的，我同門做的轉(zhuǎn)化率就比較低，但是救過是一樣的啊！

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

4樓2011-09-05 22:14:58

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

造血干細(xì)胞

銅蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 89.1
帖子: 49
在線: 9.4小時
蟲號: 1325909

西瓜: 一般可以看1ng質(zhì)粒（你可以用本實(shí)驗(yàn)室最常用的那個質(zhì)粒）轉(zhuǎn)化后可以得到多少菌落。你第一次做覺得菌落很多數(shù)不過來，第二次做就可以稀釋10倍、100倍或者更高。數(shù)的時候，可以把平板分成4份或者更多（前提是涂布比較均勻），然后只數(shù)其中一份的菌落數(shù)。最后計算下就ok了。 2011-09-08 22:10:22

引用回帖:

3樓: Originally posted by linlingdaiyu at 2011-09-05 21:38:21:
我的感受態(tài)效率都挺高的啊

問題是：多少算高？那個10的7-8次方在板上怎么看，求解

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

5樓2011-09-06 09:13:13

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

造血干細(xì)胞

銅蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 89.1
帖子: 49
在線: 9.4小時
蟲號: 1325909

引用回帖:

2樓: Originally posted by 天使托 at 2011-09-05 15:50:43:
有時候長太多并不是一件好事情。。。。十幾個，幾個就OK了。。。
哪怕只有一個，只要對就OK�。�！

我已經(jīng)做出來了，但老師說轉(zhuǎn)化效率不行，一直在重復(fù)做感受態(tài)

贊一下

回復(fù)此樓

6樓2011-09-06 09:14:33

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

sfb1020

金蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 1271.3
帖子: 241
在線: 68小時
蟲號: 466293

★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
dhd997(金幣+2): good 2011-09-09 07:55:25

轉(zhuǎn)化效率高的可以長滿滿一板菌，連單菌落也挑不出來。要是那種轉(zhuǎn)化效率高的涂板的時候就要少涂點(diǎn)

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

7樓2011-09-06 09:42:10

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

wanhscn

木蟲 (職業(yè)作家)

★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

引用回帖:

6樓: Originally posted by 造血干細(xì)胞 at 2011-09-06 09:14:33:
我已經(jīng)做出來了，但老師說轉(zhuǎn)化效率不行，一直在重復(fù)做感受態(tài)

會不會老板對你要求期望要比其他人高。一般老板對不同學(xué)生要求不同！

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

8樓2011-09-06 10:52:56

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

荊荊

新蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 2 (幼兒園)
金幣: 33.2
帖子: 18
在線: 4.1小時
蟲號: 1395524

★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
dhd997(金幣+2): 鼓勵經(jīng)驗(yàn)交流 2011-09-09 07:55:45

我?guī)熜衷f把平板平分成十個左右的扇形，粗略數(shù)一下單菌落數(shù)以此估計平板單菌落數(shù)，菌落也不能長太多，以免挑取時困難。

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

9樓2011-09-08 21:48:06

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

sayfxxk2u

新蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 253.4
帖子: 107
在線: 13小時
蟲號: 1080276

★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

引用回帖:

5樓: Originally posted by 造血干細(xì)胞 at 2011-09-06 09:13:13:
問題是：多少算高？那個10的7-8次方在板上怎么看，求解

10的7-8次方一般是指轉(zhuǎn)化1ng的pUC-19質(zhì)粒，在板子上長的菌落數(shù)達(dá)到10的7-8次方。轉(zhuǎn)化的時候，最后一步不離心后涂板，可以取出的菌液稀釋，而不進(jìn)行離心，然后涂板。然后可以計算你原先轉(zhuǎn)化成功的感受態(tài)細(xì)胞有多少。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

10樓2011-09-09 00:31:30

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

冰風(fēng)顫木

金蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
金幣: 2618
帖子: 612
在線: 174.8小時
蟲號: 1424985

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖

送紅花一朵

引用回帖:

11樓: Originally posted by linqin1029 at 2011-09-09 10:14:13
如果你要確定感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率，可將一定量的完整質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到感受態(tài)細(xì)胞中，取一部分轉(zhuǎn)化的細(xì)菌，涂布到選擇培養(yǎng)基上，可用菌落生長單位/μg DNA，按下面的方法計算感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。計算公式：轉(zhuǎn)化效率＝產(chǎn) ...

回復(fù)的很好謝謝了啊學(xué)習(xí)了啊

贊一下

回復(fù)此樓

12樓2013-06-10 16:15:11

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]	作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 考研調(diào)劑 +5	Sanmu-124 2026-03-26	5/250	2026-03-30 13:36 by chemdavid
[考研] 310求調(diào)劑 +9	爭取九點(diǎn)睡 2026-03-30	9/450	2026-03-30 11:44 by Wang200018
[考研] 375求調(diào)劑 +6	雨夏整夜 2026-03-29	6/300	2026-03-30 10:21 by herarysara
[考研] 0856求調(diào)劑 +8	楒桉 2026-03-28	8/400	2026-03-30 10:00 by wzy-lxz
[考研] 一志愿211，335分，0856，求調(diào)劑院校和導(dǎo)師 +7	傾____蕭 2026-03-27	8/400	2026-03-30 09:37 by longlotian
[考研] 化學(xué)0703 調(diào)劑 306分一志愿211 +7	26要上岸 2026-03-28	7/350	2026-03-29 20:04 by 無際的草原
[考研] 調(diào)劑310 +12	溫柔的晚安 2026-03-25	13/650	2026-03-29 20:01 by 無際的草原
[考研] 289求調(diào)劑 +5	BrightLL 2026-03-29	5/250	2026-03-29 17:24 by zhyzzh
[考研] 291求調(diào)劑 +5	Y-cap 2026-03-29	6/300	2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 一志愿鄭州大學(xué)，080500學(xué)碩，總分317分求調(diào)劑 +8	舉個栗子oi 2026-03-24	9/450	2026-03-29 13:08 by peike
[考研] 求調(diào)劑，一志愿南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分 +7	@taotao 2026-03-29	7/350	2026-03-29 12:03 by longlotian
[考研] 08開頭275求調(diào)劑 +4	拉誰不重要 2026-03-26	4/200	2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 305求調(diào)劑 +5	哇盧卡庫 2026-03-26	5/250	2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 348求調(diào)劑 +4	小懶蟲不懶了 2026-03-27	5/250	2026-03-27 12:47 by 果果媽咪
[碩博家園] 北京林業(yè)大學(xué)碩導(dǎo)招生廣告 +6	kongweilin 2026-03-26	8/400	2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7	陳瀅瑩 2026-03-26	9/450	2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 341求調(diào)劑 +7	青檸檬1 2026-03-26	7/350	2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 打過很多競賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3	askeladz 2026-03-26	3/150	2026-03-26 09:08 by 給你你注意休息
[考研] 【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分求相關(guān)專業(yè)調(diào)劑名額 +4	袁奐奐 2026-03-25	8/400	2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 一志愿山東大學(xué)藥學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +3	開開心心沒煩惱 2026-03-23	4/200	2026-03-24 00:06 by 開開心心沒煩惱