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pyflxxx新蟲 (小有名氣)
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[求助]
[求助]為什么我的PCR電泳連陽性都跑不出,幫幫我吧。
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事情是這樣的,我做的 是巢式PCR,要跑兩輪PCR才跑電泳。 上周,我試了下,拿以前陽性對照的第一輪PCR產(chǎn)物直接加2ul,電泳跑出了陽性。 這周我又同上周一樣做了一次陽性對照,電泳也出陽性了。 可是今天,我拿了幾個已知陽性樣本,加一個之前跑出來過的陽性對照,做了兩輪PCR,電泳連陽性對照都跑不出來。沒有條帶。 我是拿第一輪PCR產(chǎn)物稀釋十倍,再取2ul當(dāng)做第二輪PCR的模板。 請幫我分析分析是什么問題? 我都要哭了,這說明我之前檢測的樣本都做得不對。 是試劑有問題嗎?如果試劑有問題,我上周直接拿陽性對照跑PCR,取2ul加到,25ul的體系,如果有問題,應(yīng)該這個跑不出來的吧? |
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