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[求助]
SDS-PAGE跑谷蛋白無法濃縮,實驗圖彌撒的問題
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銀蟲 (小有名氣)
木蟲 (著名寫手)
至尊木蟲 (文壇精英)
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗: +248 |
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分離膠我做過6、8、10、12%的,結果壓縮程度為12%最好,6%最差,條帶很拖。 在很多因素都沒法排除的情況下,120伏是不可取的,因為沖得快往往使得本來就差的效果更差。在效果很好的情況下你可以120,但效果本來就差的,就應該更小,比如60,濃縮膠和分離膠都別太快。 膠凝固的因素,可能過硫酸銨失效,配新的。 電泳液的pH值也別搞錯了,反正現(xiàn)在還沒能找到原因,就每次都用新的,因為舊的可能臟。 跑膠的溫度雖然是如果是變性膠就無所謂,但現(xiàn)在效果這么差,不妨降溫。緩沖液4度預冷,跑的時候把槽放到裝了冰水混合物的盆里。 你的泡泡較多,如果SDS不超過1克每升,那你的緩沖液就該換了。 蛋白質電泳的影響因素太多,很難說的,最好就是什么都換成新的,別去找原因了,可能會浪費時間。 |

銀蟲 (正式寫手)
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