 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2100 | 回復(fù): 6 | |||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||||
[求助]
SDS-PAGE跑谷蛋白無法濃縮，實(shí)驗(yàn)圖彌撒的問題
|
|||||
|
我在做種子谷蛋白SDS-PAGE的實(shí)驗(yàn)。最近幾次實(shí)驗(yàn)都出現(xiàn)了濃縮膠階段無法濃縮的問題，一直到分離膠都是彌散很寬。 然后結(jié)果就很不好分析，這兩張還好點(diǎn)，還有更無法分清楚的，條帶只能勉強(qiáng)數(shù)，但肯定是不能用的三。 之前一直是恒流20mA（橫流后，剛開始電壓大概50V）跑的，然后我今天又重新試了下，打算濃縮膠部分電壓搞高點(diǎn)看行不，就跑了恒壓120V（剛開始電流大概60mA），結(jié)果還是彌散，已經(jīng)到分離膠了還是彌散的。結(jié)果肯定也不行 敢問有經(jīng)驗(yàn)的師兄師姐，能幫忙分析下原因嗎？？ 實(shí)驗(yàn)圖 這個(gè)是我剛剛拍的照片，已經(jīng)到到了分離膠的地方了，完全沒有濃縮到�。。�！ [ Last edited by 66suyuan on 2011-10-21 at 12:17 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
070300化學(xué)求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
085404 22408 315分
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
材料與化工272求調(diào)劑
已經(jīng)有22人回復(fù)
-
347求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
354求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿華東理工大學(xué)，080500學(xué)碩，317分，求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿a區(qū)211，085601-307分求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
284求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
求調(diào)劑：085600材料與化工，考材科基，總分319
已經(jīng)有18人回復(fù)
-
362求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- SDS-PAGE問題請(qǐng)教
已經(jīng)有10人回復(fù)
- SDS-PAGE 電泳蛋白分子量飄移
已經(jīng)有12人回復(fù)
- SDS-PAGE蛋白電泳
已經(jīng)有24人回復(fù)
- SDS-PAGE 蛋白膠跑膠問題
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 關(guān)于SDS-PAGE電泳問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- SDS-PAGE蛋白電泳條帶問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】SDS-PAGE電泳圖 求高人幫忙分析下問題所在 謝謝啦！
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白樣品加熱煮過和不煮，SDS-PAGE結(jié)果差異顯著，這是為何？
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】SDS-PAGE電泳分離膠和濃縮膠濃度問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】SDS-PAGE電泳問題
已經(jīng)有38人回復(fù)
- 外文期刊中蛋白質(zhì)電泳圖（SDS-PAGE）如何處理
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】用于SDS-PAGE的菌液樣品濃縮問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教，SDS-PAGE的問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
專家經(jīng)驗(yàn): +248 - BioEPI: 73
- 應(yīng)助: 257 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.272
- 金幣: 19479.4
- 散金: 1704
- 紅花: 121
- 帖子: 6591
- 在線: 2779.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 856414
- 注冊(cè): 2009-09-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
- 管轄: 微生物
【答案】應(yīng)助回帖
adslye(BioEPI+1): 2011-10-23 14:53:20
66suyuan(金幣+5): 2011-10-24 20:13:16
66suyuan(金幣+5): 2011-10-24 20:13:16
|
分離膠我做過6、8、10、12%的，結(jié)果壓縮程度為12%最好，6%最差，條帶很拖。 在很多因素都沒法排除的情況下，120伏是不可取的，因?yàn)闆_得快往往使得本來就差的效果更差。在效果很好的情況下你可以120，但效果本來就差的，就應(yīng)該更小，比如60，濃縮膠和分離膠都別太快。 膠凝固的因素，可能過硫酸銨失效，配新的。 電泳液的pH值也別搞錯(cuò)了，反正現(xiàn)在還沒能找到原因，就每次都用新的，因?yàn)榕f的可能臟。 跑膠的溫度雖然是如果是變性膠就無所謂，但現(xiàn)在效果這么差，不妨降溫。緩沖液4度預(yù)冷，跑的時(shí)候把槽放到裝了冰水混合物的盆里。 你的泡泡較多，如果SDS不超過1克每升，那你的緩沖液就該換了。 蛋白質(zhì)電泳的影響因素太多，很難說的，最好就是什么都換成新的，別去找原因了，可能會(huì)浪費(fèi)時(shí)間。 |
6樓2011-10-22 06:03:50
小兵pp
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 299.1
- 散金: 1
- 帖子: 237
- 在線: 41.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1050874
- 注冊(cè): 2010-07-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
2樓2011-10-21 13:08:24
yitiandeng
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 45 (小學(xué)生)
- 金幣: 2863
- 散金: 1323
- 紅花: 4
- 帖子: 1224
- 在線: 317.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 667147
- 注冊(cè): 2008-12-03
- 專業(yè): 軍事學(xué)其他學(xué)科
3樓2011-10-21 22:03:57
jurkat.1640
至尊木蟲 (文壇精英)
- BioEPI: 2
- 應(yīng)助: 908 (博后)
- 金幣: 17180.5
- 散金: 1654
- 紅花: 121
- 沙發(fā): 41
- 帖子: 14525
- 在線: 2184.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 514340
- 注冊(cè): 2008-02-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學(xué)
4樓2011-10-21 22:30:41
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿085600中科院寧波所276分求調(diào)劑 +10 | 材料學(xué)257求調(diào)劑 2026-03-28 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 08工科，295，接受跨專業(yè)調(diào)劑 +6 | lmnlzy 2026-03-30 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600，專業(yè)課化工原理，320分求調(diào)劑 +6 | 大饞小子 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +10 | 深V宿舍吧 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 食品工程專碩一志愿中海洋309求調(diào)劑 +5 | 小張zxy張 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +16 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑：一志愿湖南大學(xué) 材料與化工（085600），已過六級(jí)。 +9 | XX小鄧 2026-03-29 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703 化學(xué) 求調(diào)劑，一志愿山東大學(xué) 342 分 +7 | Shern—- 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 面上5B能上會(huì)嗎？ +7 | redcom 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +5 | Feisty。 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +6 | 愛羈絆 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085405 考的11408求各位老師帶走 +3 | Qiu學(xué)ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿南師大0703化學(xué) 275求調(diào)劑 +4 | Ripcord上岸 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 08開頭275求調(diào)劑 +4 | 拉誰不重要 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大085600，310分求調(diào)劑 +5 | 李瀟可 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 | Russ_ss 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 林之夕 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)339材料與化工求調(diào)劑 +3 | 江往賣魚 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|