 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2067 | 回復(fù): 6 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||||
[求助]
SDS-PAGE跑谷蛋白無法濃縮，實(shí)驗(yàn)圖彌撒的問題
|
||||
|
我在做種子谷蛋白SDS-PAGE的實(shí)驗(yàn)。最近幾次實(shí)驗(yàn)都出現(xiàn)了濃縮膠階段無法濃縮的問題，一直到分離膠都是彌散很寬。 然后結(jié)果就很不好分析，這兩張還好點(diǎn)，還有更無法分清楚的，條帶只能勉強(qiáng)數(shù)，但肯定是不能用的三。 之前一直是恒流20mA（橫流后，剛開始電壓大概50V）跑的，然后我今天又重新試了下，打算濃縮膠部分電壓搞高點(diǎn)看行不，就跑了恒壓120V（剛開始電流大概60mA），結(jié)果還是彌散，已經(jīng)到分離膠了還是彌散的。結(jié)果肯定也不行 敢問有經(jīng)驗(yàn)的師兄師姐，能幫忙分析下原因嗎？？ 實(shí)驗(yàn)圖 這個是我剛剛拍的照片，已經(jīng)到到了分離膠的地方了，完全沒有濃縮到�。。�！ [ Last edited by 66suyuan on 2011-10-21 at 12:17 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
考研求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085601材料工程專碩求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
296求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級已過，有科研經(jīng)歷
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
268求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
301求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- SDS-PAGE問題請教
已經(jīng)有10人回復(fù)
- SDS-PAGE 電泳蛋白分子量飄移
已經(jīng)有12人回復(fù)
- SDS-PAGE蛋白電泳
已經(jīng)有24人回復(fù)
- SDS-PAGE 蛋白膠跑膠問題
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 關(guān)于SDS-PAGE電泳問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- SDS-PAGE蛋白電泳條帶問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】SDS-PAGE電泳圖 求高人幫忙分析下問題所在 謝謝啦！
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白樣品加熱煮過和不煮，SDS-PAGE結(jié)果差異顯著，這是為何？
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】SDS-PAGE電泳分離膠和濃縮膠濃度問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】SDS-PAGE電泳問題
已經(jīng)有38人回復(fù)
- 外文期刊中蛋白質(zhì)電泳圖（SDS-PAGE）如何處理
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】用于SDS-PAGE的菌液樣品濃縮問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】請教，SDS-PAGE的問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
小兵pp
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 299.1
- 散金: 1
- 帖子: 237
- 在線: 41.5小時
- 蟲號: 1050874
- 注冊: 2010-07-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
2樓2011-10-21 13:08:24
yitiandeng
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 45 (小學(xué)生)
- 金幣: 2863
- 散金: 1323
- 紅花: 4
- 帖子: 1224
- 在線: 317.2小時
- 蟲號: 667147
- 注冊: 2008-12-03
- 專業(yè): 軍事學(xué)其他學(xué)科
3樓2011-10-21 22:03:57
jurkat.1640
至尊木蟲 (文壇精英)
- BioEPI: 2
- 應(yīng)助: 908 (博后)
- 金幣: 17148.7
- 散金: 1654
- 紅花: 121
- 沙發(fā): 41
- 帖子: 14518
- 在線: 2183.8小時
- 蟲號: 514340
- 注冊: 2008-02-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學(xué)
4樓2011-10-21 22:30:41
5樓2011-10-22 00:05:14
冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
專家經(jīng)驗(yàn): +248 - BioEPI: 73
- 應(yīng)助: 257 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.272
- 金幣: 19454.4
- 散金: 1704
- 紅花: 121
- 帖子: 6586
- 在線: 2777.2小時
- 蟲號: 856414
- 注冊: 2009-09-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
- 管轄: 微生物
【答案】應(yīng)助回帖
adslye(BioEPI+1): 2011-10-23 14:53:20
66suyuan(金幣+5): 2011-10-24 20:13:16
66suyuan(金幣+5): 2011-10-24 20:13:16
|
分離膠我做過6、8、10、12%的，結(jié)果壓縮程度為12%最好，6%最差，條帶很拖。 在很多因素都沒法排除的情況下，120伏是不可取的，因?yàn)闆_得快往往使得本來就差的效果更差。在效果很好的情況下你可以120，但效果本來就差的，就應(yīng)該更小，比如60，濃縮膠和分離膠都別太快。 膠凝固的因素，可能過硫酸銨失效，配新的。 電泳液的pH值也別搞錯了，反正現(xiàn)在還沒能找到原因，就每次都用新的，因?yàn)榕f的可能臟。 跑膠的溫度雖然是如果是變性膠就無所謂，但現(xiàn)在效果這么差，不妨降溫。緩沖液4度預(yù)冷，跑的時候把槽放到裝了冰水混合物的盆里。 你的泡泡較多，如果SDS不超過1克每升，那你的緩沖液就該換了。 蛋白質(zhì)電泳的影響因素太多，很難說的，最好就是什么都換成新的，別去找原因了，可能會浪費(fèi)時間。 |
6樓2011-10-22 06:03:50
adslye
銀蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 10
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 貴賓: 0.244
- 金幣: 364.9
- 散金: 766
- 紅花: 6
- 帖子: 514
- 在線: 119.5小時
- 蟲號: 845336
- 注冊: 2009-09-11
- 性別: GG
- 專業(yè): 流行病學(xué)方法與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)
【答案】應(yīng)助回帖
|
你的實(shí)驗(yàn)是最近出現(xiàn)這樣的情況，也就是說之前是好的？那就基本是你試劑過期了。而彌散，主要是因?yàn)椋?br />
1.膠的空間結(jié)構(gòu)過于稀疏（可以理解為膠濃度低），導(dǎo)致的分離塔板數(shù)較低，以致分離能力差。 2.電壓方面只是給它一個外在的力，在分離能力強(qiáng)的情況下（可以理解為膠濃度高，空間結(jié)構(gòu)好），這個外力可以提高，實(shí)現(xiàn)更高更省時的分離。通俗地理解液相其實(shí)也是這樣。 因此，可以和前面的人建議的，更換溶液，重新來過。應(yīng)該不會出現(xiàn)這樣的情況。 祝順利！ |
7樓2011-10-23 15:16:46
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 66suyuan 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | △小透明* 2026-03-17 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | A_JiXing 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
[考研] 085601求調(diào)劑 +4 | Du.11 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑0856材料化工 +13 | z2839474511 2026-03-11 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +6 | 孔志浩 2026-03-12 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 太陽花天天開心 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +7 | 邱gl 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +6 | 大可digkids 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑 +5 | Liwangman 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600調(diào)劑 +5 | 漾漾123sun 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 東華理工大學(xué)化材專業(yè)26屆碩士博士申請 +6 | zlingli 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[基金申請] 現(xiàn)在如何回避去年的某一個專家，不知道名字 +3 | zk200107 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩285求調(diào)劑 +13 | Wisjxn 2026-03-12 | 46/2300 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學(xué)員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +4 | 番茄頭--- 2026-03-10 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩288分求調(diào)劑 一志愿211 +4 | 在家想你 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 337一志愿華南理工0805材料求調(diào)劑 +7 | mysdl 2026-03-11 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 四川大學(xué)085601材料工程專碩 初試294求調(diào)劑 +4 | 祝我們好在冬天 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +3 | miaodesi 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 資源與環(huán)境 285 +3 | 未名考生 2026-03-10 | 3/150 |
|