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mYang88新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
多個(gè)亞基蛋白 ORF串聯(lián)表達(dá)
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請(qǐng)問(wèn)：4個(gè)亞基的蛋白 ，4個(gè)ORF可否串聯(lián)在一起 構(gòu)建一個(gè)重組子表達(dá) 如果可以，那么 （1）ORF之間是否需要添加其他序列 （2）4個(gè)ORF共用一個(gè)啟動(dòng)子會(huì)不會(huì)影響表達(dá)效率 （3）每個(gè)ORF都要保留有完整的其實(shí)種子密碼子么 （4）構(gòu)建重組子時(shí)應(yīng)注意哪些問(wèn)題 不勝感激！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
wanhscn(金幣+4, MolEPI+1): 很好,很熱心!授予專(zhuān)家指數(shù)一枚! 2011-11-12 10:01:16
wanhscn(金幣+4, MolEPI+1): 很好,很熱心!授予專(zhuān)家指數(shù)一枚! 2011-11-12 10:01:16
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把stop codon 去掉是可以的，這是融合表達(dá)，GFP是用來(lái)做報(bào)告基因的，但是我感覺(jué)樓主需要的是翻譯的蛋白還能組裝，所以建議如果做融合表達(dá)的話(huà)在兩蛋白之間加一柔性linker 當(dāng)然也可以做單promoter的表達(dá)，一個(gè)promoter，基因不去除stop codon，在第二個(gè)基因之前加RBS序列 呵呵，最簡(jiǎn)單的是一個(gè)promoter加一個(gè)基因。后面再一個(gè)promoter加一個(gè)基因，才四個(gè)嘛，怕什么，人家基因組都組裝起來(lái)了 |
7樓2011-11-11 23:25:01
mYang88
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3樓2011-11-01 17:16:17
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