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Icityman

鐵蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] 關(guān)于PCR無(wú)結(jié)果的原因

最近跑的PCR一直不是很順利，采用的體系和程序都是參照師兄師姐的，自己設(shè)計(jì)了不同梯度的退火溫度，但結(jié)果還是沒(méi)有，除了拖尾還是拖尾，怎么改進(jìn)優(yōu)化，請(qǐng)各位高手好心人幫忙解決��！謝謝！！

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1樓 2011-12-06 10:08:29

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julietguo

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★ ★
西瓜(金幣+2): 歡迎常來(lái)哦 2011-12-06 22:57:21

模板、引物和dNTP反復(fù)凍融會(huì)影響PCR擴(kuò)增效果的，你要不要換個(gè)新的模板試試？

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7樓2011-12-06 16:06:50

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bbwalkman

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1949stone(金幣+1): 水一般不會(huì)吧 2011-12-06 11:37:55

1.你呢樣品沒(méi)有問(wèn)題吧，不行換一下
2.看看引物怎么樣，是不是不合理還是怎么回事
3.水是不是污染了，換新的看看吧

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2樓2011-12-06 10:18:08

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Icityman

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引用回帖:

2樓: Originally posted by bbwalkman at 2011-12-06 10:18:08:
1.你呢樣品沒(méi)有問(wèn)題吧，不行換一下
2.看看引物怎么樣，是不是不合理還是怎么回事
3.水是不是污染了，換新的看看吧

這個(gè)。。樣品是師姐給的，引物時(shí)我參照codehop自己設(shè)計(jì)出來(lái)的，照講有拖尾就應(yīng)該是擴(kuò)增出來(lái)了啊，水污染的可能性比較小吧

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3樓2011-12-06 10:51:03

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xiali-yu

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1949stone(金幣+1): 后一個(gè) 估計(jì)一般同學(xué)不會(huì)犯 2011-12-06 11:38:33
Icityman(金幣+9): 1 2011-12-07 10:01:02

模板濃度你知道不？如果模板濃度過(guò)高，pcr也不會(huì)出來(lái)產(chǎn)物，還有就是引物前后向濃度是否一致也會(huì)對(duì)結(jié)果有影響，建議用大公司合成隱物

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4樓2011-12-06 10:57:59

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