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flytime1115銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
有木有人做過Taqman 探針法Real-Time?? 已有1人參與
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| 我要檢測(cè)基因組中插入的某個(gè)外源片段的拷貝數(shù),需要做絕對(duì)定量。師兄建議不要用sybr 燃料做,建議用探針法做,F(xiàn)在毫無頭緒,不知道怎么設(shè)計(jì),怎么合成?望各位高人指點(diǎn)一下…… |
鐵桿木蟲 (著名寫手)
| 我做過檢測(cè)重組畢赤酵母中外源基因拷貝數(shù)的實(shí)驗(yàn),用的就是探針法,內(nèi)參用的是GAPDH,檢測(cè)的準(zhǔn)確度和重復(fù)性還是很好的!引物和探針你自己不要設(shè)計(jì),交給專業(yè)的設(shè)計(jì)公司設(shè)計(jì)和合成,也不是很貴,國內(nèi)的公司一套探針引物(包括上下游引物,探針)也就1200+吧,國外的ABI等公司合成一般要貴一倍左右,一般可以做1500-2000個(gè)樣品。SYBY法不是很準(zhǔn)確,精確定量最好還是用探針法,我的實(shí)驗(yàn)用的樣品的基因組DNA和你的不大一樣,不過原理差不多的。 |

金蟲 (正式寫手)
銅蟲 (初入文壇)
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