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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » rna條帶問題
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斯多格格銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
rna條帶問題
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| 為什么提取的真菌RNA跑膠后，28s的亮度和寬度是18s的2倍呢（提取的比較好的情況下）？我在實驗室問了好多師兄師姐，解答都不怎么理想，還請各位蟲友幫忙解答下，謝謝啦！ |
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斯多格格
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4樓2012-02-03 17:29:39
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yabxxh
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【答案】應助回帖
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斯多格格(金幣+5): ★★★★★最佳答案 前輩肯定不在乎這幾個金幣啦，還是多謝前輩熱心幫助哈。對我?guī)椭艽�，再次感謝。 2012-02-03 21:06:31
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wanhscn(金幣+2, MolEPI+1): Good! 2012-02-04 08:48:31
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wanhscn(金幣+2, MolEPI+1): Good! 2012-02-04 08:48:31
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這個應該是這樣的，rRNA分子量大，代謝也不活躍，原核生物中主要有5s，16s和23s rRNA，真核生物中主要有5s，5.8s，18s和28s。 一般來說，28s的分子量大約為4.7k，18s的分子量大約為1.9k，而在細胞內(nèi)28s和18s的分子數(shù)是相同的，因為它們來源于同一個轉(zhuǎn)錄本，所以，摩爾數(shù)相同，質(zhì)量的比值就等于分子量的比值，這也是很多人用28s：18s是否為2:1來判斷提取的RNA質(zhì)量高低的理論依據(jù)。 當然理論必竟是理論，實際操作中會因為上樣量、電泳條件和物種之間的差異而出現(xiàn)，28s:18s不等于2:1的情況，甚至會出現(xiàn)18s亮度大于28s的情況。這樣我們就要具體問題具體分析了。最好是用分光光度計測一下ratio值，水洗脫的話，在1.8-2.0之間的話就不錯，如果用試劑盒里面的Elution Buffer可能會高于2.0。 希望能幫到你。 |
3樓2012-02-03 17:28:40
斯多格格
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5樓2012-02-03 21:15:41
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