 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2998 | 回復(fù): 13 | |||
zhjzhou木蟲 (著名寫手)
|
[求助]
基因克隆中酶切連接問題
|
||
| 各位大俠好，我克隆一個2000bp左右的基因，一開始設(shè)計(jì)的引物沒有加酶切位點(diǎn)，PCR產(chǎn)物直接連接到T-vector中，已經(jīng)測序和我的目的基因完全吻合。于是又重新設(shè)計(jì)加上酶切位點(diǎn)的引物，從質(zhì)粒上PCR，這樣PCR產(chǎn)物純化后可以直接連接到我要克隆的載體中，不需要酶切吧。我是這樣做的，現(xiàn)在遇到問題了，我連接的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化老是長不出來。請各位指點(diǎn)下，我PCR產(chǎn)物和載體都需要酶切，再進(jìn)行連接嗎？我以前PCR產(chǎn)物沒有酶切直接連接都可以的，現(xiàn)在不知道是怎么回事情了 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 核酸方面 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有114人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- PCR ， 雙酶切，連接問題
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 分子克隆連接問題！
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 求助 雙酶切驗(yàn)證陽性克隆的問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助】基因克隆T載體酶切問題等
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 克隆基因和載體連接后轉(zhuǎn)化至大腸桿菌，為什么每次涂板都是空平板沒有菌落？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【分享】分子克隆實(shí)驗(yàn)專題-（二）酶切連接要點(diǎn)探討
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】目的基因與pPIC9K連接的問題！
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒雙酶切連接問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】克隆載體的制備 連接問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】基因克隆時，酶切有結(jié)果，PCR卻P不出來
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】基因克隆實(shí)驗(yàn)為非目的片段？
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 請教：基因克隆 酶切
已經(jīng)有2人回復(fù)
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
- 貴賓: 0.238
- 金幣: 17138.7
- 紅花: 43
- 帖子: 2251
- 在線: 712.4小時
- 蟲號: 111074
- 注冊: 2005-11-20
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2012-02-20 17:00:29
merckten123
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 111.1
- 帖子: 17
- 在線: 1.5小時
- 蟲號: 1628252
- 注冊: 2012-02-20
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
2樓2012-02-20 13:25:27
zhjzhou
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 4918.4
- 散金: 1910
- 紅花: 5
- 帖子: 1243
- 在線: 145.1小時
- 蟲號: 42073
- 注冊: 2004-03-09
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
4樓2012-02-20 19:45:05
panda73
金蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 80 (初中生)
- 金幣: 1201.3
- 散金: 44
- 紅花: 2
- 帖子: 191
- 在線: 42.5小時
- 蟲號: 985964
- 注冊: 2010-03-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
5樓2012-02-20 22:44:28
scienzyme
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 19 (小學(xué)生)
- 金幣: 14457.4
- 紅花: 2
- 帖子: 1723
- 在線: 343.7小時
- 蟲號: 137301
- 注冊: 2005-12-17
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
6樓2012-02-21 08:13:18
7樓2012-02-21 08:26:20
zhjzhou
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 4918.4
- 散金: 1910
- 紅花: 5
- 帖子: 1243
- 在線: 145.1小時
- 蟲號: 42073
- 注冊: 2004-03-09
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
8樓2012-02-21 08:43:37
yanbofeiyue
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 199
- 帖子: 40
- 在線: 23.5小時
- 蟲號: 1344019
- 注冊: 2011-07-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 食品加工技術(shù)
9樓2012-02-21 09:22:16
whb21
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 105 (高中生)
- 金幣: 9711.3
- 散金: 625
- 紅花: 7
- 帖子: 2994
- 在線: 172.4小時
- 蟲號: 928584
- 注冊: 2009-12-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
10樓2012-02-21 09:35:21
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 zhjzhou 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考博] 環(huán)境領(lǐng)域全國重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室招收博士1-2名 +3 | QGZDSYS 2026-03-13 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +3 | 簡單點(diǎn)0 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +9 | 冬十三 2026-03-15 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程專碩求調(diào)劑 +5 | 慕寒mio 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +5 | 大口吃飯 身體健 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級551，有科研經(jīng)歷 +3 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +5 | 上岸的小葡 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +6 | 世界首富 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工求調(diào)劑 +5 | 緒幸與子 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 +4 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 文思客 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 290分有科研經(jīng)歷，論文在投 +7 | 膩膩gk 2026-03-14 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科院，化學(xué)方向，295求調(diào)劑 +4 | 一氧二氮 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +5 | 是Lupa啊 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +3 | miaodesi 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856化學(xué)工程280分求調(diào)劑 +4 | shenzxsn 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 270求調(diào)劑 085600材料與化工專碩 +3 | YXCT 2026-03-11 | 3/150 |
|