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酵母轉(zhuǎn)化后篩選
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| 大家好，最近剛剛做酵母遇到了一點(diǎn)問(wèn)題，想請(qǐng)教下大家，我是做的畢赤酵母的轉(zhuǎn)化，首先我將我的質(zhì)粒(pPIC9K)線性化之后電轉(zhuǎn)進(jìn)入酵母中，同時(shí)涂了MD板和YPD板（0.25mg/ml G418），MD板上生長(zhǎng)了很多的單菌落，YPD板上沒(méi)有生長(zhǎng)，隨后又將在MD板上生長(zhǎng)的菌落挑取到Y(jié)PD（1mg/ml G418）板上 發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)的菌落很少,而同期做的其他的轉(zhuǎn)化卻生長(zhǎng)了很多菌落，正在糾結(jié)中...還望大俠給解釋下下一步怎么做？接種在YPD板上的菌落和接種量有關(guān)嗎？用牙簽挑單菌落時(shí)應(yīng)該注意些什么等等？并請(qǐng)給分析下原因 謝謝了... |
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路基亞的暴誕
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2樓2012-03-08 11:49:52
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